[发明专利]CRISPR-Cas9靶向敲除SLC30A1基因及其特异性的sgRNA在审
| 申请号： | 201711282037.8 | 申请日： | 2017-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN108148835A | 公开（公告）日： | 2018-06-12 |
| 发明（设计）人： | 马佩敏;孙子豪;杨兴林;潘讴东 | 申请（专利权）人： | 和元生物技术（上海）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/867;C12N15/90;C12N5/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201321 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明公开了CRISPR/Cas9靶向敲除人乳腺癌细胞SLC30A1基因及其特异性sgRNA。首先是获得特异性靶向SLC30A1基因的sgRNA，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；其次是构建SLC30A1基因的sgRNA到慢病毒载体系统，该系统含有Cas9蛋白；最后将含有该sgRNA的CRISPR/Cas9慢病毒感染人乳腺癌细胞MDA‑MB‑231，获得SLC30A1蛋白表达水平显著降低的细胞株。本发明具有操作步骤简单、sgRNA靶向性好、且对SLC30A1基因切割效率高；此外，所构建的CRISPR/Cas9慢病毒系统具有敲除效率高的优势，并能特异性敲除SLC30A1基因，得到敲除SLC30A1基因的人乳腺癌细胞，从而为进一步研究乳腺癌细胞中SLC30A1的作用机制提供强有力的工具。 | ||
| 搜索关键词： | 敲除 基因 人乳腺癌细胞 靶向 构建 慢病毒载体系统 蛋白表达水平 慢病毒感染 乳腺癌细胞 特异性靶向 碱基序列 切割效率 作用机制 靶向性 慢病毒 细胞株 蛋白 研究 | ||
【主权项】：
一种CRISPR/Cas9 靶向敲除人乳腺癌细胞SLC30A1基因及其特异性的sgRNA，其特征在于，首先设计获得特异性靶向SLC30A1 基因的sgRNA；其次构建SLC30A1基因的sgRNA到慢病毒载体系统；然后将此慢病毒载体系统感染人乳腺癌细胞MDA‑MB‑231，得到的SLC30A1基因敲除细胞株。
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