[发明专利]一种规模化的卵黄抗体提取方法有效
申请号: | 201711304243.4 | 申请日: | 2017-12-11 |
公开(公告)号: | CN108059674B | 公开(公告)日: | 2021-02-19 |
发明(设计)人: | 赵光伟 | 申请(专利权)人: | 重庆三杰众鑫生物工程有限公司 |
主分类号: | C07K16/02 | 分类号: | C07K16/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 402460 重庆市荣昌*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | 本发明公开了一种规模化的卵黄抗体提取方法,包括如下步骤:将高免鸡蛋消毒后进行卵黄分离;将分离的卵黄搅拌成糊状后加入注射用水,卵黄与注射水的体积比为1:1.5‑1:3;再将卵黄液体的PH值调整为5.0‑5.2;再加入浓度为1.5‑3%的辛酸溶液,搅拌均匀后静止2‑3h将卵黄液体进行过滤,当80%的下层清液过滤完毕后,将剩余的液体进行均匀搅拌后继续进行过滤,收集滤液;再加入适量的注射用水对滤液进行稀释得到清液,再将清液的PH值调整为6.0‑7.0,再加入终浓度为0.05%的甲醛溶液,将清液进行再次过滤,收集滤液进行分装后进行检验,检验合格之后贴标转入成品库。本发明使得卵黄抗体的生产周期明显缩短、生产成本降低、产品的纯度更高和延长的产品的保质期。 | ||
搜索关键词: | 一种 规模化 卵黄 抗体 提取 方法 | ||
【主权项】:
1.一种规模化的卵黄抗体提取方法,其特征在于,包括如下步骤:1)将高免鸡蛋用0.1%的新洁尔灭消毒液浸泡消毒15min,再用甲醛熏蒸消毒30min;2)将消毒后的高免鸡蛋进行手工或者机械打蛋操作,将卵黄进行分离;3)将步骤2)中分离得到的卵黄转入搅拌罐中,将卵黄搅拌成糊状,再向搅拌罐中加入注射用水,卵黄与注射水的体积比为1:1.5-1:3;继续搅拌25-35min,搅拌速度为450-550r/min,搅拌完毕之后;再向卵黄中逐步滴加适量的醋酸-醋酸钠缓冲液至PH值为5.0-5.2时,停止滴加;4)向步骤3)中得到的卵黄中加入适量浓度为1.5-3%的辛酸溶液,添加完毕后进行搅拌,搅拌速度为280-320r/min,在室温条件下静止2-3h将卵黄液体进行分层,即上层为卵黄脂蛋白固态物,下层为含有卵黄抗体的清液;5)在容器的顶面上设置有过滤装置,过滤装置的透气量为17-19L/m2 .s,搅拌罐底部出口处连接有管道至容器上方,打开搅拌罐底部阀门,同时对搅拌罐进行加压至压力为0.05-0.1MPa,下层清液在过滤装置中过滤,当80%的下层清液过滤完毕之后,将搅拌罐底部的阀门关闭,同时开启搅拌电机将搅拌罐内的卵黄脂蛋白固态物和剩余20%的下层清液搅拌进行均匀混合;关闭搅拌电机,再向搅拌罐加压使罐内压力维持在0.1-0.15MPa之间,再打开阀门,将搅拌罐内的卵黄液体全部进行过滤,收集滤液;6)将步骤5)中得到的滤液转入配液罐中,加入适量的注射用水对滤液进行稀释,边搅拌边滴加2M的氢氧化钠溶液直至滤液的PH值为6.0-7.0时,停止滴加,然后再加入终浓度为0.05%的甲醛溶液,搅拌至均匀;7)将配液罐中的清液通过灭菌板框过滤器进行再次过滤,在配液罐中加压至压力为0.15-0.2MPa,收集滤液进行分装后进行检验,检验合格之后贴标转入成品库,即得到卵黄抗体成品。
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