[发明专利]一种抑制巨噬细胞刺激乳腺癌细胞存活的高通量药物筛选系统

摘要

本发明涉及生物医药领域，公开了一种抑制巨噬细胞刺激乳腺癌细胞存活的高通量药物筛选系统，包括：1）初步筛选：将巨噬细胞和乳腺癌细胞混合培养，分析药物对受巨噬细胞刺激的乳腺癌细胞活性的抑制作用，得到初筛阳性药物；2）二次筛选：将初筛阳性药物加入到单独培养的巨噬细胞和乳腺癌细胞中，分析判断后，筛得能将TAM从M2表型重新塑造为M1表型或能干扰/阻断乳腺癌细胞与巨噬细胞间信号回路的药物。本发明的筛选系统能够通过单独培养及共同培养小鼠巨噬细胞RAW264.7和小鼠三阴性乳腺癌细胞4T1来筛选将巨噬细胞重塑至M1表型或能干扰/阻断乳腺癌细胞与巨噬细胞间信号回路的药物。

主权项

1.一种抑制巨噬细胞刺激乳腺癌细胞存活的高通量药物筛选系统，其特征在于包括以下步骤：1）初步筛选：建立药物库，将所有药物分别稀释到统一浓度，将巨噬细胞和乳腺癌细胞混合培养，分析药物在混合培养条件下对受巨噬细胞刺激的乳腺癌细胞活性的抑制作用，根据需求设定一个临界值，将细胞活力抑制率大于等于临界值的药物定义为初筛阳性药物，进入第二次筛选；2）二次筛选：计算并对初筛阳性药物进行梯度稀释，加入到单独培养的巨噬细胞和乳腺癌细胞中，分析判断药物的抑癌作用是源自于：a、对巨噬细胞或乳腺癌细胞的单独抑制作用；b、对两种细胞的共同抑制作用；c、能重塑巨噬细胞表型而抑制混合培养下的乳腺癌细胞；d、能干扰或阻断乳腺癌细胞与巨噬细胞间信号回路；最后筛得能将TAM从M2表型重新塑造为M1表型的药物以及能干扰或阻断乳腺癌细胞与巨噬细胞间信号回路的药物。