[发明专利]一种CYP2C9和/或VKORC1基因多态性快速检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种检测CYP2C9和/或VKORC1基因多态性的试剂盒，所述试剂盒含有下列组分：热启动taq DNA聚合酶、血液直接PCR缓冲液(10X)、引物对、探针对和UNG酶；简单、高效、安全：可对血液样本直接进行荧光PCR扩增，无需经过核酸提取和纯化等步骤，降低模板交叉污染的风险，避免了苯酚等有害试剂的使用；灵敏度高：可准确检出低至2μl血液样本，所需样本量少，特异性好：针对CYP2C9C430T、CYP2C9A1075C和VKORC1G‑1639A设计特异的引物和分型探针，可特异性扩增识别对应的多态性。

主权项

1.一种检测CYP2C9和/或VKORC1基因多态性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有下列组分：热启动taq DNA聚合酶、10X血液直接PCR缓冲液、引物对、探针对和UNG酶；所述引物对为选自以下中的至少一组：针对CYP2C9 C430T的SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4、针对CYP2C9 A1075C的SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.10，针对VKORC1 G‑1639A的SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.16；所述探针为选自以下针对相应引物位点的突变型探针和野生型探针的至少一组：针对CYP2C9 C430T的SEQ ID NO.22和SEQ ID NO.19、针对CYP2C9 A1075C的SEQ ID NO.28和SEQ ID NO.25，针对VKORC1 G‑1639A的SEQ ID NO.34和SEQ ID NO.31，探针的5'端和3'端标记有荧光基团；所述10X血液直接PCR缓冲液包括有：100±1mM Tris‑HCL、500±5mM KCl、20±1mM MgCl2、50±5％甘油、25±1％DMSO、0.5±0.05％Tween‑20，pH8.3±0.1。