[发明专利]一种辅酶Q10的提取制备方法在审

专利信息
申请号: 201711334342.7 申请日: 2017-12-14
公开(公告)号: CN109957583A 公开(公告)日: 2019-07-02
发明(设计)人: 刘乃山;马雪 申请(专利权)人: 青岛华迈士药业有限公司
主分类号: C12P7/66 分类号: C12P7/66;C07C46/10;C12R1/38
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 266100 山东*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 一种辅酶Q10的提取制备方法,本发明公开了辅酶Q10注射液及其制备方法,其制备方法是利用光合细菌发酵后离心得到浓缩菌泥,再进行破壁得到破壁菌体,对破壁菌体皂化后用石油醚进行萃取得辅酶Q10粗制品,将粗制品进行吸附、洗脱、浓缩等制成符合注射剂要求的静脉注射制剂,纯度达93.4%。本发明方法步骤简单,操作简便,原理可靠,设计科学,成本低廉,溶剂平均回收率高,条件可控,提取效率高,产品纯度好。
搜索关键词: 制备 辅酶 破壁 粗制品 菌体 浓缩 辅酶Q10注射液 静脉注射制剂 产品纯度 光合细菌 提取效率 石油醚 注射剂 溶剂 菌泥 可控 吸附 洗脱 皂化 回收率 发酵
【主权项】:
1.一种辅酶Q10的提取制备方法,其特征在于:采用细菌发酵、化学皂化、洗脱方法制备辅酶Q10,其特征在于包括如下步骤: (1)细菌发酵:将培养用水加入透光容器后,加入培养用水重量0.1%的消毒剂,搅拌均匀、静置后过滤得灭菌清液;向灭菌清液中加入培养用水重量1%的细菌培养剂,充分溶解、搅匀后得培养液,向培养液中加入沼泽红假单胞菌种液并搅拌均匀;把已接种好的沼泽红假单胞菌分装至发酵容器中,置于室外有光照处,每日搅拌十次以上,15‑40℃条件下培养2‑5天至生物量达108时采收;(2)离心浓缩:将采收的沼泽红假单胞菌菌液用离心机离心,使离心率达95%以上,得到浓缩菌泥;(3)破壁处理:将浓缩菌泥放入细胞破碎机进行破壁处理,控温10℃以下,压力10000Pa,反复两次,使菌体破壁率达90%以上,以得到破壁菌体;(4)皂化处理:向每150kg的破壁菌体中加入焦性没食子酸700g,氢氧化钾5kg,甲醇35kg和纯净水50L,混合均匀后放入反应釜中回流30min,然后迅速冷却至室温;(5)萃取回收:向反应釜中加入石油醚萃取2次,每次加入的石油醚的体积数与步骤(4)中破壁菌体的质量数的比值为1:1,然后快速搅拌5分钟,在温度为20℃条件下静置1h后分离萃取液,将两次萃取液合并回收;将反应釜升温至65℃,经挥发回收残留石油醚,反应釜中所剩物即为辅酶Q10粗制品;(6)纯化处理:具体步骤包括:Ⅰ.将辅酶Q10粗制品用无水乙醇溶解后制成体积百分比浓度为20%的辅酶Q10乙醇溶液;Ⅱ.将辅酶Q10乙醇溶液加入反应釜中,每100L辅酶Q10乙醇溶液中加入树脂30kg,持续搅拌30min,使辅酶Q10充分被树脂吸附,然后分离取出树脂;Ⅲ.将吸附有辅酶Q10的树脂用丙酮解析洗脱2次;Ⅳ.将两次丙酮洗脱液进行合并,减压到常压101325Pa,回收丙酮后得到辅酶Q10浓缩液;Ⅴ.将浓缩液在0℃条件静置过夜24小时有结晶体析出,回收结晶体经干燥后得纯品,纯度达93.4%。
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