[发明专利]琼脂细胞蜡块及其制备方法

摘要

本发明涉及一种琼脂细胞蜡块及其制备方法，涉及生物技术领域。该制备方法包括：将细胞样本在1900‑2100r/min的条件下离心4‑6min，收集第一沉淀样本。将第一沉淀样本与融化的琼脂混合，得到的混合液于2‑4℃冷藏18‑22min，得细胞块初始样本。将细胞块初始样本经拭镜纸包裹后，固定、脱水、透明、浸蜡以及包埋。其制备效率高，操作简便，制得的琼脂细胞蜡块含有的细胞较为聚集，结构清晰，染色对比度佳，同时细胞成分多，细胞结构完整，高倍背景清晰，有效提高诊断的准确率。 1

主权项

1.一种琼脂细胞蜡块的制备方法，其特征在于，包括：

将细胞样本在1900‑2100r/min的条件下离心4‑6min，收集第一沉淀样本；

将所述第一沉淀样本与融化的琼脂混合，得到的混合液于2‑4℃冷藏18‑22min，得细胞块初始样本；

将细胞块初始样本经拭镜纸包裹后，固定、脱水、透明、浸蜡以及包埋。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述第一沉淀样本包括所述细胞样本离心所得的沉淀以及高于所述沉淀1cm以内的上清液。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，混合包括：将融化的琼脂铺设于包埋框后，将所述第一沉淀样本置于具有琼脂的所述包埋框后，于45‑47℃烘烤3‑5min，缓慢加入融化的琼脂，于50‑55℃烘烤3‑5min。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，固定包括：将包裹后的细胞块初始样本置于脱水盒后，采用浓度为3.5‑4wt％或9.5‑10.5wt％的中性甲醛溶液，固定1.8‑2.3h。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，脱水包括：在44‑46℃，于体积分数为70‑80％的乙醇溶液中脱水60‑70min后，于体积分数为90‑96％的乙醇溶液中脱水80‑90min，接着在无水乙醇中脱水2‑3次，每次脱水50‑60min。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，透明包括：在45‑47℃的条件下，采用二甲苯对脱水后的所述细胞块初始样本进行连续浸泡2‑3次，每次浸泡20‑25min。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，浸蜡包括第一次浸蜡以及第二次浸蜡，所述第一次浸蜡进行30‑35min，第二次浸蜡进行110‑130min。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述第一次浸蜡于58‑60℃的条件下进行，所述第二次浸蜡于60‑63℃的条件下进行。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在包埋后，还包括切片以及染色。

10.如权利要求1‑9任意一项所述的制备方法制得的琼脂细胞蜡块。