[发明专利]去甲氨噻肟酸乙酯粗品中杂质的分离方法

摘要

本发明属于药物化学分析技术领域，具体的涉及一种去甲氨噻肟酸乙酯粗品中杂质的分离方法。用LC‑MS法测定去甲氨噻肟酸乙酯，根据相对保留时间和/或分子量确定去甲氨噻肟酸乙酯中的一种或多种杂质；使用反相硅胶柱富集与相对保留时间和/或分子量对应的一种或多种杂质，进一步分离纯化，收集所述相对保留时间和/或分子量对应的一种杂质。本发明检测方法简单、结果准确，适用于头孢类样品的杂质分析控制。采用LC‑MS法与反相硅胶柱联合使用分离富集去甲氨噻肟酸乙酯杂质，杂质回收率达到5％～10％，去甲氨噻肟酸乙酯的纯度为96.5％～98％。

主权项

1.一种去甲氨噻肟酸乙酯粗品中杂质的分离方法，其特征在于：具体包括以下步骤：

(1)用LC‑MS法测定去甲氨噻肟酸乙酯，根据相对保留时间和/或分子量确定去甲氨噻肟酸乙酯中的一种或多种杂质；

(2)使用反相硅胶柱富集与相对保留时间和/或分子量对应的一种或多种杂质，进一步分离纯化，收集所述相对保留时间和/或分子量对应的一种杂质。

2.根据权利要求1所述的去甲氨噻肟酸乙酯粗品中杂质的分离方法，其特征在于：LC‑MS法测定所采用的流动相pH值为2.00～5.00。

3.根据权利要求1所述的去甲氨噻肟酸乙酯粗品中杂质的分离方法，其特征在于：LC‑MS法测定所采用的流动相溶剂为水‑乙腈‑甲醇，缓冲液为磷酸二氢钾。

4.根据权利要求3所述的去甲氨噻肟酸乙酯粗品中杂质的分离方法，其特征在于：流动相中包含30％～60％乙腈，0.1％～0.6％磷酸二氢钾，水20％～25％，剩余为甲醇。

5.根据权利要求1所述的去甲氨噻肟酸乙酯粗品中杂质的分离方法，其特征在于：LC‑MS法检测中HPLC采用的测量条件为：流动相溶剂为水‑乙腈‑甲醇混合溶液，缓冲液为磷酸二氢钾；柱温是20‑40℃；流速为1‑1.5ml/min；检测波长为245～260；色谱柱是固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，型号为150×4.6×5um或150mm×4.6×3.5um或150mm×2.1×5um的不锈钢色谱柱。

6.根据权利要求1所述的去甲氨噻肟酸乙酯粗品中杂质的分离方法，其特征在于：质谱解析中采用ESI正离子检测；扫描范围为100～3000m/z。

7.根据权利要求5所述的去甲氨噻肟酸乙酯粗品中杂质的分离方法，其特征在于：HPLC测定时色谱柱的梯度洗脱步骤为：

(1)将样品溶解于甲醇中后，湿法上柱；

(2)先用较低极性的乙酸乙酯300ml冲洗柱子，再依次用纯甲醇溶液100ml、80％甲醇‑水溶液300ml、60％甲醇‑水溶液300ml、40％甲醇‑水溶液300ml和20％甲醇‑水溶液300ml洗脱；每个浓度梯度分4批接收，每批接收50ml；

(3)富集溶液进行HPLC检测。

8.根据权利要求1所述的去甲氨噻肟酸乙酯粗品中杂质的分离方法，其特征在于：所述杂质具有如下结构式：

分子离子峰[M+H]⁺为296.009，该杂质的分子量为295.009，比去甲氨噻肟酸乙酯分子量215.04多了80.969，为溴化乙酰乙酸乙酯与硫脲反应的未关环产物。

9.根据权利要求1所述的去甲氨噻肟酸乙酯粗品中杂质的分离方法，其特征在于：所述杂质具有如下结构式：

分子离子峰[M+H]⁺为202.02，即该杂质的分子量为201.2，比去甲氨噻肟酸乙酯分子量215.04少了13.84，为去甲氨噻肟酸乙酯中的酯基水解产物。