[发明专利]一种八珍汤配方颗粒的质量检测方法

摘要

本发明公开了一种八珍汤配方颗粒的质量检测方法，包括人参、白芍、炙甘草、当归和川芎的薄层色谱定性鉴别和芍药苷、阿魏酸及甘草酸含量检测，本发明建立了八珍汤配方颗粒中人参、白芍、炙甘草、当归、川芎的薄层色谱定性鉴别，并同时对八珍汤配方颗粒中芍药苷、阿魏酸及甘草酸进行了含量测定，该检测方法具有较强的专属性、耐用性，其准确性、重现性、稳定性，能够有效保证产品质量的稳定性和可控性。 1

主权项

1.一种八珍汤配方颗粒的质量检测方法，其特征在于，包括薄层色谱定性鉴别和含量检测：

（1）人参的薄层色谱定性鉴别：

取本品6g，研细，加甲醇50ml，加热回流1‑2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水5ml使溶解，加水饱和的正丁醇50ml，超声处理20‑40分钟，滤过，滤液每次加浓氨水50ml氨洗，氨洗2‑4次，分取正丁醇层，合并，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取人参对照药材3g，加水50ml，煮沸20‑40分钟，浓缩至近干，加甲醇50ml，同法制成对照药材溶液；取人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rg1对照品及人参皂苷Rf对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录ⅥB试验，吸取上述供试品溶液10µl、对照药材溶液10µl及对照品溶液2µl分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比三氯甲烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑水=15：40：22：10于10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的荧光斑点；

（2）白芍的薄层色谱定性鉴别：

 取本品2g，研细，加甲醇50ml，超声处理20‑40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水50ml使溶解，滤过，滤液用乙醚50ml提取，弃去乙醚液，水液用正丁醇50ml提取，分取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录ⅥB试验，吸取上述供试品溶液2µl、对照品溶液5µl，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以体积比乙酸乙酯‑甲醇‑水=100∶17∶13为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%浓硫酸香草醛溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，于日光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点 ；

（3）炙甘草的薄层色谱定性鉴别：

取本品3g，研细，加7%的硫酸45%乙醇溶液50ml，加热回流1‑2小时，滤过，放冷，滤液加沸程60～90℃的石油醚振摇提取1‑3次，每次20ml，收集石油醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草次酸对照品，加甲醇制成1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录ⅥB试验，吸取上述供试品溶液8µl、对照品溶液3µl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比沸程30～60℃石油醚‑甲苯‑乙酸乙酯‑冰乙酸=10∶20∶7∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（4）川芎、当归的薄层色谱定性鉴别

取本品6g，研细，加1%碳酸氢钠溶液50ml，超声处理20‑40分钟，离心，取上清液用稀盐酸调节pH值至2～3，用乙醚振摇提取1‑3次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取阿魏酸对照品，加甲醇制成1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录ⅥB试验，吸取上述供试品溶液10µl、对照品溶液10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比环己烷‑二氯甲烷‑乙酸乙酯‑甲酸=2.5:1:1:0.1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；再喷1%三氯化铁和1%铁氰化钾按质量比为1∶1的混合液，日光下观察；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（5）含量测定：

采用高效液相色谱法进行测定，具体方法和步骤如下：

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以

0.05%磷酸溶液为流动相B，按下表所示梯度洗脱；检测波长为240nm，理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备 取芍药苷、阿魏酸及甘草酸铵对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1ml含芍药苷、阿魏酸及甘草酸铵100µg、40µg、50µg的溶液，即得；

供试品溶液的制备 取本品1.0g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理15‑20 分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

2.根据权利要求1所述的一种八珍汤配方颗粒的质量检测方法，其特征在于，所述八珍汤配方颗粒由人参、炒白术、茯苓、炙甘草、熟地黄、川芎、当归、白芍按质量比为1‑5:1‑5:1‑5:1‑5:1‑5:1‑5:1‑5:1‑5制成，其制备方法包括如下步骤：

取人参、炒白术、茯苓、炙甘草、熟地黄、川芎、当归、白芍共八味饮片，煎煮二次，每次加8‑12倍量水，煎煮1‑2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.05～1.08，得清膏，将清膏加麦芽糊精，喷雾干燥，收集干膏粉，将干膏粉加麦芽糊精混匀，制粒，即得。

3.根据权利要求2所述的一种八珍汤配方颗粒的质量检测方法，其特征在于，所述八珍汤配方颗粒由人参、炒白术、茯苓、炙甘草、熟地黄、川芎、当归、白芍按质量比为1:1:1:1:1:1:1:1制成，其制备方法包括如下步骤：

取人参、炒白术、茯苓、炙甘草、熟地黄、川芎、当归、白芍共八味饮片，煎煮二次，每次加10倍量水，煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.05～1.08，得清膏，将清膏加麦芽糊精，喷雾干燥，收集干膏粉，将干膏粉加麦芽糊精混匀，制粒，即得。