[发明专利]荧光标记细胞色素c的固定化方法及用途在审
| 申请号： | 201711358078.0 | 申请日： | 2017-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN108107030A | 公开（公告）日： | 2018-06-01 |
| 发明（设计）人： | 唐乾;曹洪玉;王立皓;郑学仿 | 申请（专利权）人： | 大连大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 大连智高专利事务所(特殊普通合伙) 21235 | 代理人： | 胡景波 |
| 地址： | 116622 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本分案申请涉及荧光标记细胞色素c的固定化方法及用途，属于生物检测领域。该方法包括以下步骤：(1)从微生物中提取纯化细胞色素c；(2)将细胞色素c与荧光素反应制备荧光标记的细胞色素c，除去游离荧光素；(3)用异丙醇铝制备铝胶母液；(4)将步骤(2)和(3)的产物混匀，涂布固相载体。所述方法制备的固定化荧光标记细胞色素c对溶液中NO响应快，可多次重复使用，具有较好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 荧光标记细胞 细胞色素c 固定化 色素c 制备 生物检测领域 多次重复 固相载体 提取纯化 异丙醇铝 荧光标记 游离荧光 荧光素 混匀 铝胶 母液 微生物 响应 申请 应用 | ||
【主权项】：
1.一种荧光标记细胞色素c的固定化方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将菌体冻融后，超声破碎，上清液过离子交换色谱，洗脱液再过分子筛层析，获得电泳纯的细菌源细胞色素c；(2)将细胞色素c溶解于NaHCO3 溶液中，加入荧光素琥珀酰亚胺酯，混匀，4℃反应2h，pH7.4磷酸盐缓冲液透析，除去未结合的游离荧光素二乙酸酯；(3)取异丙醇铝加入沸水中，80℃搅拌45min，加入1M的HCl，煮沸1h，冷却至4℃，制备铝胶母液；(4)取等量的步骤(2)和(3)的产物混匀，4℃反应1h，均匀涂覆于固相载体表面；其中，所述细胞色素c来自光合细菌。
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