[发明专利]一种烟草中磷酸化蛋白质组检测分析方法有效
申请号: | 201711365971.6 | 申请日: | 2017-12-18 |
公开(公告)号: | CN108181418B | 公开(公告)日: | 2020-03-10 |
发明(设计)人: | 刘萍萍;周会娜;陈千思;郑庆霞;张慧;王晨;徐国云;翟妞;金立锋;陈霞;申晓晔 | 申请(专利权)人: | 中国烟草总公司郑州烟草研究院 |
主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/08 |
代理公司: | 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 | 代理人: | 时立新 |
地址: | 450001 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明属于蛋白检测技术领域,具体涉及一种针对烟草中的磷酸化蛋白质组的检测分析方法。该方法包括:获得烟草中的磷酸化蛋白质组、富集所获得的磷酸化肽段、上样检测分析(Nano液相色谱和质谱检测分析)、分析评价等步骤。由于磷酸化蛋白质对于植物生长的特殊作用与意义,针对此问题,本申请针对烟草中的磷酸化蛋白质组,提供了一种检测分析方法,利用该方法可对烟草中蛋白质变化情况进行研究和分析,进而可为具体功能性蛋白的筛选和确定提供指导方向,同时也可为植物生理研究、植物品质改良奠定理论和应用基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 烟草 磷酸化 蛋白质 检测 分析 方法 | ||
【主权项】:
1.一种烟草中磷酸化蛋白质组检测分析方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:(1)以烟草叶片为样品,获得烟草中的磷酸化蛋白质组;(2)富集步骤(1)中所获得的磷酸化肽段,具体地:采用Ti4+‑MAC法对磷酸化肽段进行富集,富集比例为1:5~20;(3)对步骤(2)中的富集后蛋白质组进行上样检测分析,具体地:依次进行Nano液相色谱和质谱检测分析;(4)对步骤(3)中的测定数据进行分析评价,具体为:根据步骤(3)中所得检测结果,将结果数据在Protein Pilot 软件中进行搜库定性,确定磷酸化修饰的蛋白,并与烟草基因组数据库进行比对。
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