[发明专利]一种包含黄连素的双敏性脂质体的制备方法

摘要

本发明涉及一种包含黄连素的双敏性脂质体的制备方法，该脂质体主要由磷脂酰胆碱、聚乙二醇衍生化磷脂、不饱和磷脂、黄连素与聚(2‑乙基丙烯酸)所组成。该新型脂质体的平均粒径为435nm，pH敏感范围为5.2～7.0，热敏感范围为39℃～48℃，具有pH敏感性与热敏感性。在实践应用中，本发明制备的双敏性脂质体，具有稳定性好，靶向性强等优点；同时本发明的双敏性脂质体制备方法简单易行。

主权项

1.一种包含黄连素的双敏性脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将5.5mol蛋黄卵磷脂与4.5mol胆固醇共溶于10mL氯仿中，40℃旋转蒸发成膜，真空干燥24h，加入到10mLPBS缓冲液中，使用超声仪每隔2s～3s间歇超声2min，得到空白脂质体溶液。(2)以1:6的质量比取酸敏剂聚(2-乙基丙烯酸)与十四烷基胺反应，制得100mg聚(2-乙基丙烯酸)脂肪酰胺衍生物，加入到步骤1制备的空白脂质体溶液中，40℃搅拌24h，搅拌完成后以HBS缓冲液为洗脱液通过SePharose CL-6B色谱柱洗脱未嵌入脂质体的衍生物，得到pH敏脂质体溶液。(3)称取0.9g二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、0.06g氢化大豆磷脂(HSPC)与0.04g二硬脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-PEG2000)，共溶于10mL氯仿中，60℃旋转蒸发成膜，真空干燥24h，加入到10mL PBS缓冲液中，使用超声仪每隔2s～3s间歇超声2min，得到热敏脂质体溶液。(4)将1体积的pH敏脂质体溶液、1体积的热敏脂质体溶液加入到4体积的氯仿/甲醇(体积比2:1)混合溶液，旋转蒸发成膜，真空干燥24h，加入到2体积的黄连素浓度为1mg/mL的黄连素的PBS缓冲液中，使用超声仪每隔2s～3s间歇超声2min，得到包载有黄连素的双敏性脂质体。(5)将步骤(4)制得的双敏性脂质体通过0.45μm孔径的聚碳酸酯膜过滤，得到双敏性脂质体。