[发明专利]一种适用于弓形虫的ELISA的方法有效
| 申请号： | 201711381495.7 | 申请日： | 2017-12-20 |
| 公开（公告）号： | CN108048478B | 公开（公告）日： | 2019-11-05 |
| 发明（设计）人： | 陈启军;李烨馨;姜宁;杨娜;桑晓宇;冯颖 | 申请（专利权）人： | 沈阳农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/66;G01N33/96;G01N33/68 |
| 代理公司： | 沈阳科威专利代理有限责任公司 21101 | 代理人： | 张述学 |
| 地址： | 110866 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 一种适用于弓形虫的ELISA的方法，其特征是使用TGME49_223140 His标签重组蛋白质及GST标签重组蛋白质对猪血清进行检测；将对含有目的片段的pEASY Simple Blunt质粒进行双酶切，并将表达载体pET‑28a，pGEX4T‑1用同样的限制性内切酶进行双酶切；将重组表达载体pET‑28a、pGEX4T‑1分别转化到工程菌E.coilBL21(DE3)和E.coil BL21中，进行蛋白质表达与纯化；分别使用纯化的TGME49_223140His标签重组蛋白质以及GST标签重组蛋白质作为包被蛋白质，建立ELISA检测方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 适用于 弓形虫 elisa 方法 | ||
【主权项】：
1.一种弓形虫检测试剂盒的制备方法，其特征是：采用TGME49_223140 基因编码的带有His标签重组蛋白质或GST标签重组蛋白质进行包被用于检测弓形虫，所述TGME49_223140基因核苷酸序列见SEQ ID No.1；上述基因的两对PCR特异性扩增引物序列如下：TGME49_223140‑His:上游:TTCATATGCAGCGACAGCCGCCGCTCT（NdeⅠ）下游:AAACTCGAGTTAAGAGATGGTGCCTCCGACGATA（XhoⅠ）TGME49_223140‑GST:上游:TTTGGATCCATGGAGCTCATCTACGACTCG（BamHⅠ）下游:AAAACTCGAGTTAAGAGATGGTGCCTCCGAC（XhoⅠ）。
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