[发明专利]一种蔗糖转化酶工业化生产方法在审
| 申请号： | 201711389350.1 | 申请日： | 2017-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN108070579A | 公开（公告）日： | 2018-05-25 |
| 发明（设计）人： | 许建立;洪振农 | 申请（专利权）人： | 中诺生物科技发展江苏有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 224300 江苏省盐城市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开一种蔗糖转化酶工业化生产方法，步骤是：一级种子培养液的制备；二级种子培养液的制备；种子罐液培养；发酵罐液培养；发酵培养结束后分离出湿菌体；配制成菌悬液；使用高压均质机循环破碎；破碎液通过中空纤维膜、0.2μm中空纤维微滤膜、30万道尔顿中空纤维膜、3万道尔顿中空纤维膜分级过滤处理，得到纯度高的蔗糖转化酶浓缩液：S9、蔗糖转化酶浓缩液经过0.5μm液体预过滤器，0.22μm液体除菌过滤器进行除菌过滤，得到无菌酶液；S10、无菌酶液经过精密药用低温喷雾干燥得到无菌蔗糖转化酶粉剂。本发明产品收率高，活性高，纯度高，生产成本得到控制并且符合食品酶制剂质量要求。 | ||
| 搜索关键词： | 蔗糖转化酶 中空纤维膜 无菌 浓缩液 酶液 制备 二级种子培养液 一级种子培养液 低温喷雾干燥 除菌过滤器 高压均质机 食品酶制剂 除菌过滤 发酵培养 分级过滤 预过滤器 中空纤维 粉剂 发酵罐 活性高 菌悬液 破碎液 湿菌体 微滤膜 种子罐 收率 生产成本 精密 破碎 | ||
【主权项】：
1.一种蔗糖转化酶工业化生产方法，其特征在于：该生产方法的步骤是：S1、一级种子培养液的制备：将酿酒酵母菌株冻存管接种到一级种子液中进行培养，在26～30℃，200～240rpm摇床条件下培养20～28小时；S2、二级种子培养液的制备：将一级种子培养液转入二级种子液中进行培养，在26～30℃，200～240rpm摇床条件下培养20～28小时；S3、种子罐液培养：将二级种子培养液按照约1％接种量接入种子罐培养基中，在26～30℃，240rpm种子罐条件下培养20～28小时；S4、发酵罐液培养：将种子罐液按约10％接种量接入发酵罐培养基中，在27-29℃，200～240rpm发酵罐条件下培养约48～52小时；S5、发酵培养结束后，使用8000转/分蝶式离心机分离出湿菌体；S6、湿菌体使用PH5.6的PBS缓冲液清洗后配制成约250g/L菌体浓度的菌悬液；S7、使用100～150MPa的高压均质机循环破碎3～5次；S8、破碎液通过中空纤维膜分级过滤处理，得到纯度高的蔗糖转化酶浓缩液：使用0.2μm中空纤维微滤膜去除大分子物质，蔗糖转化酶在透析液中；使用30万道尔顿中空纤维膜进一步去除较大分子物质，蔗糖转化酶在透析液中；使用3万道尔顿中空纤维膜去除小分子物质，蔗糖转化酶在浓缩液中；S9、蔗糖转化酶浓缩液经过0.5μm液体预过滤器，0.22μm液体除菌过滤器进行除菌过滤，得到无菌酶液；S10、无菌酶液经过精密药用低温喷雾干燥得到无菌蔗糖转化酶粉剂。
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