[发明专利]一种UPLC‑MS‑MS快速筛查熏硫白芍与非熏硫白芍差异性的方法

摘要

本发明公开了一种UPLC‑MS‑MS快速筛查熏硫白芍与非熏硫白芍差异性的方法，包括（1）收集待区分的熏硫白芍与非熏硫白芍药材，制成标准汤剂样品；（2）将样品进入UPLC‑MS‑MS系统分析，得到质谱数据；（3）将原始采集的数据直接导入至Compound Discoverer2.1，进行数据分析；（4）采用动态规划计算法校正色谱峰漂移，对齐色谱峰，利用最邻近聚类方法将保留时间较为接近的物质注册成为一个化合物；（5）利用方差分析计算样品间差异性的物质，确定熏硫白芍与非熏硫白芍的差异性。本发明将化合物质谱信息输出为原始文件，不需转换成其他格式，可直接导入至Compound Discoverer2.1库中搜索化合物，该方法能够实现快速锁定中药材样本中存在的差异性化合物，适用于大批量样本快速分析测定。

主权项

一种UPLC‑MS‑MS快速筛查熏硫白芍与非熏硫白芍差异性的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）收集待区分的熏硫白芍与非熏硫白芍药材，按采收加工过程中是否熏硫，将不同批次熏硫白芍与非熏硫白芍药材各分为一组，将每组熏硫白芍与非熏硫白芍药材制成相应的熏硫白芍标准汤剂样品和非熏硫白芍标准汤剂样品，粉碎，过60目筛，于‑20℃下避光保存；（2）取步骤（1）的熏硫白芍与非熏硫白芍标准汤剂样品各0.4g，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，超声处理20‑40分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，得到供试品溶液，随后进入UPLC‑MS‑MS系统进行分析，分别得到每个熏硫白芍与非熏硫白芍标准汤剂样品对应的质谱数据；（3）将步骤（2）采集的数据直接导入至Compound Discoverer2.1，然后进行数据分析，针对每个样品进行色谱峰提取和质谱信息表征；（4）选择物质色谱峰数量最多的样品作为参照样品，采用动态规划计算法校正样品间的色谱峰漂移，对齐属于同一物质的色谱峰，然后利用最邻近聚类方法将保留时间较为接近的物质注册成为一个化合物，最终建立一个样品和色谱峰的注册图表；经过外标校正后，用于后续的分析；（5）利用方差分析计算样品间差异性的物质，置信水平阈值设定为0.05，将置信水平小于0.05的物质视作差异性化合物，将所有差异性物质的质谱信息的原始文件直接导入到Compound Discoverer2.1库中进行匹配，确定物质结构，从而得到差异性物质；然后通过色谱的峰面积和出峰保留时间对应的准分子离子峰的质量数确定熏硫白芍与非熏硫白芍的差异性。