[发明专利]一种治疗糖尿病药物的检测方法

摘要

本技术方案公开了一种治疗糖尿病药物的检测方法，所述治疗糖尿病药物是按如下方法制备的：以楝叶、香椿叶为原料，提取，分离，纯化，即得含有山楝体C、山楝体F、毛麻楝内酯K的治疗糖尿病药物，其检测方法为，采用硅胶G薄层板检测，可见3个特征斑点,HPLC检测，可见3个特征色谱峰。

主权项

1.一种治疗糖尿病药物的检测方法，其特征在于所述的治疗糖尿病药物按如下方法制备:（1）取相同重量的楝叶、香椿叶，混匀，粉碎，过20目筛，用石油醚为溶剂，50℃提取2次，每次提取时间为3小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的12倍，滤过，合并石油醚提取液，减压回收石油醚，浓缩干燥得粗提物A，石油醚提取后的药渣备用；（2）将步骤（1）石油醚提取后的药渣，用体积比1:6的乙酸乙酯‑甲醇混合溶剂提取，70℃提取3次，每次提取时间为2小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的10倍，滤过，合并乙酸乙酯‑甲醇提取液，减压回收溶剂，浓缩干燥得粗提物B，乙酸乙酯‑甲醇提取后的药渣备用；（3）将步骤（2）乙酸乙酯‑甲醇提取后的药渣，用体积比3:7的水‑乙醇混合溶剂提取，80℃提取2次，每次提取时间为1.5小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的15倍，滤过，合并水‑乙醇提取液，减压回收溶剂，浓缩干燥得粗提物C，水‑乙醇提取后的药渣备用；（4）将步骤（3）水‑乙醇提取后的药渣，用水提取，90℃提取2次，每次提取时间为1小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的8倍，滤过，合并水提取液，减压浓缩至浸膏，干燥得粗提物D；（5）将步骤（2）得到的粗提物B，经过重量份数比1:2混合均匀的MCI 凝胶‑聚酰胺混合色谱柱，先用体积比5:100的甲醇‑水洗脱，洗脱量为10个色谱柱体积，再用体积比20:100的甲醇‑水洗脱，洗脱量为15个色谱柱体积，收集体积比20:100的甲醇‑水洗脱液合并，回收溶剂，干燥得提取物E；（6）将步骤（3）得到的粗提物C，经过重量份数比1:1混合均匀的S8大孔吸附树脂‑LSA21大孔吸附树脂混合树脂柱，先用体积比10:100的乙醇‑水洗脱，洗脱量为3个树脂柱体积，再用体积比40:100的乙醇‑水洗脱，洗脱量为3个树脂柱体积，收集体积比40:100的乙醇‑水洗脱液合并，回收溶剂，干燥得提取物F；（7）按重量比1:2将步骤（5）得到的提取物E与步骤（6）得到的提取物F混匀，即得治疗糖尿病药物；按如下方法检测：取治疗糖尿病药物50mg，加体积比3:1的醋酸乙酯‑二氯甲烷混合溶液25ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇10ml使溶解，作为供试品溶液；另取楝叶、香椿叶对照药材各3g，混匀，粉碎过80目筛，同法制成对照药材溶液；吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比8:3:2:1:6的正己烷－丙酮－醋酸甲酯－甲醇‑水的上层溶剂为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显3个相同颜色的斑点；取治疗糖尿病药物50mg，加体积比6:4的醋酸乙酯‑甲醇混合溶液50ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇10ml使溶解，作为供试品溶液；另取楝叶、香椿叶对照药材各3g，混匀，粉碎过80目筛，同法制成对照药材溶液；吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比6:4:0.5:0.1的醋酸乙酯‑二氯甲烷－丙酮‑甲醇为展开剂，展开，展距15cm，取出，晾干，喷以体积比1:2:97的二甲氨基卞亚基罗丹宁：硫酸：乙醇试液， 125℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显3个相同颜色的斑点；取治疗糖尿病药物50mg，加体积比6:5的二氯甲烷混‑甲醇混合溶液50ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇10ml使溶解，作为供试品溶液；另取楝叶、香椿叶对照药材各3g，混匀，粉碎过80目筛，同法制成对照药材溶液；吸取上述两种溶液各20µl，注入高效液相色谱仪，测定，HPLC检测条件：紫外检测器，色谱柱为ODS C18柱,流动相为体积比15:35:30的乙腈：甲醇：0.03mol/L磷酸盐缓冲液，流速1.0ml/min,柱温28℃，检测波长为215nm；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，出现3个相同保留时间的色谱峰。