[发明专利]一种简单定性/定量检测单碱基基因编辑技术工作效率的报告系统有效
| 申请号： | 201711447105.1 | 申请日： | 2017-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN109321584B | 公开（公告）日： | 2021-07-16 |
| 发明（设计）人： | 李大力;张晓辉;刘明耀 | 申请（专利权）人： | 华东师范大学;上海邦耀生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/52 | 分类号： | C12N15/52;C12N15/85;C12N15/63 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 王正君;徐迅 |
| 地址： | 200241 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明提供了一种简单定性/定量检测单碱基基因编辑技术工作效率的报告系统，具体地，本发明应用单碱基基因编辑技术(base editor)可在其突变窗口内将带有ACG靶点的单碱基胞嘧啶(C)突变为胸腺嘧啶(T)，并可快速、简便、准确的评估sgRNA的活性和突变效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 简单 定性 定量 检测 碱基 基因 编辑 技术 工作效率 报告 系统 | ||
【主权项】：
1.一种核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物具有5’‑3’的式I结构：X1‑L1‑X2‑P0‑P1‑P2‑L2‑P3‑P4 (I)；其中，X1为第一启动子序列；L1为位于X1与X2之间的间隔序列；X2为ACG序列、或ATG(N)3mTAG序列(m为0‑50的正整数)；P0为含有基因编码位点的靶序列；P1为PAM序列；P2为自剪切蛋白的编码序列；L2为无或位于X1与X2之间的间隔肽编码序列；P3为外源蛋白的编码序列，所述编码序列不含起始密码子ATG且含有终止密码子；P4为任选的PolyA序列；附加条件：当X2为ACG序列时，L1、P0和P1均不含ATG和终止密码子；并且，各“‑”独立地为键或核苷酸连接序列。
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