[发明专利]一种犬MSC外泌体制剂及其制备方法在审
申请号: | 201711449491.8 | 申请日: | 2017-12-27 |
公开(公告)号: | CN108143748A | 公开(公告)日: | 2018-06-12 |
发明(设计)人: | 王丙云;詹小舒;罗东章;李东升;陈志胜;陈胜锋;罗兆益 | 申请(专利权)人: | 佛山科学技术学院;广东维赛生物科技有限公司 |
主分类号: | A61K35/28 | 分类号: | A61K35/28;A61P17/02;A61P29/00;C12N5/0775 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 谢泳祥 |
地址: | 528000 广东省佛山市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供了一种犬MSC外泌体制剂及其制备方法。制备方法包括步骤:无外泌体胎牛血清的制备和犬MSC来源外泌体的分离。该制备方法制得的犬MSC外泌体制剂,其提取到的外泌体体积小,容易在体内循环,易于到达损伤组织;并且直接使用外泌体能保证其在体内剂量稳定,一定程度上保证了治疗效果且外泌体无任何毒副作用,为临床大规模使用奠定了基础。可用于以犬为实验模型,开发一种治疗皮肤损伤的犬MSC外泌体制剂,能以伤口周围注射或者直接敷于创面的方式对犬的皮肤伤口进行修复,抑制炎症发生,加速愈合并减少瘢痕形成。 | ||
搜索关键词: | 制备 体制剂 种犬 毒副作用 皮肤伤口 皮肤损伤 实验模型 损伤组织 胎牛血清 体内循环 治疗效果 瘢痕形成 体积小 可用 伤口 体能 注射 体内 保证 修复 合并 治疗 开发 | ||
【主权项】:
一种犬MSC外泌体制剂的制备方法,包括步骤:1)无外泌体胎牛血清的制备:用0.22um的滤膜过滤胎牛血清,滤液置于超高速离心管中,4℃,120000g超高速离心90min,收集上清液;2)犬MSC来源外泌体的分离:用10%无外泌体胎牛血清、1%双抗、1%L‑谷氨酰胺和88%DMEM基础培养基配制完全培养基,以制得的完全培养基传代培养犬MSC,取第3‑5代收集上清在4℃,300g离心10min除去死细胞;收集上清后在4℃,16500g离心20min除去细胞碎片;收集上清后用0.22um的滤膜过滤;收集上清后在4℃,120000g超高速离心90min;去上清后,用生理盐水重悬沉淀,再次以4℃,120000g超高速离心90min;去上清后,用生理盐水重悬沉淀,收集悬液即为犬MSC外泌体制剂。
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