[发明专利]一种源自酪蛋白的抗氧化生物活性多肽MPFPK及其应用

摘要

一种源自酪蛋白的抗氧化生物活性多肽MPFPK及其应用。本发明经过广泛而深入的研究，发现了本发明的生物活性肽MPFPK具有抗氧化生物学活性，主要表现为有效抑制低密度脂蛋白氧化；研究结果表明本发明中涉及的这种乳源性生物活性肽作为一类小分子物质具有潜在的清除自由基、抑制脂荷泡沫细胞形成并延缓衰老的功能。对于开发具有抗氧化功能，清除自由基，抑制低密度脂蛋白氧化等功能的乳制品、动物饲料、保健品、保健食品及药物具有十分重要的意义。

主权项

一种源自酪蛋白的抗氧化生物活性多肽MPFPK，其特征在于，由以下步骤制备而成：1)酶法制备酪蛋白抗氧化肽：采用碱性蛋白酶酶解酪蛋白，酶解液离心，取上清液旋转蒸发浓缩，冷冻干燥存于‑80℃备用，得到生物活性肽粗提取物；2)离子交换法分离抗氧化肽：采用Sephadex C‑25阳离子交换柱对步骤1)的复溶液进行分离，收集不同峰下不同组分的样品，脱盐处理后，再次旋转蒸发浓缩并冷冻干燥存于‑80℃备用；3)分子量分布测定：采用HPLC法测定不同酪蛋白抗氧化组分的分子量；4)氨基酸组成分析：采用HPLC‑异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生方法测定不同酪蛋白抗氧化组分的氨基酸组成；5)不同电荷性质肽组分抗氧化活性的测定：分别用TEAC法、ORAC法、测定抑制LDL氧化能力测定不同组分的抗氧化能力；6)验证酪蛋白肽组分对LDL氧化及荷脂细胞胆固醇含量的影响：通过建立巨噬细胞诱导建立LDL氧化模型并对模型今昔染色和进一步分析。