[发明专利]一种土壤中泰乐菌素残留量的检测方法

摘要

一种土壤中泰乐菌素残留量的检测方法，它涉及一种土壤中泰乐菌素残留效价的检测方法，该方法包括对照品溶液的制备、供试品溶液的制备，之后采用高效液相色谱法以梯度洗脱的方式将上述标准品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪中，根据外标法计算泰乐菌素效价。本发明通过对色谱条件的优选及供试品、标准品制备方法的试验，建立了土壤中泰乐菌素的高效液相色谱检测分析方法；通过对色谱以及质谱系统的优化，建立了土壤中泰乐菌素的检测方法，通过方法学验证试验研究表明：所建立的方法准确度高、专属性强、重现性良好，能有效检测土壤中泰乐菌素效价。

主权项

1.一种土壤中泰乐菌素残留量的检测方法，其特征在于它是按照以下步骤进行的：一、供试品样品制备：1)称取含有泰乐菌素的土壤，加入提取剂，涡旋振荡1～5min后，于超声中辅助提取20～30min，以3000～4000rpm离心5～10min，取上清液，并收集沉淀备用；2)向上步收集的沉淀中加入提取剂，涡旋振荡1min后，于超声中辅助提取30min，以3000～4000rpm离心10min，取上清液；3)合并步骤1)和步骤2)的上清液，将上清液于40℃水浴旋转蒸发至原体积的1/4～1/5，得无机相，向无机相中加入甲醇溶液以及pH为5.5、浓度为0.15mol/L的乙酸钠缓冲溶液；充分震荡涡旋，待残渣全部溶解后，转移到离心管中，得待净化样品；4)用甲醇和超纯水对HLB固相萃取柱进行活化，加入待净化样品，以1mL/min速度过柱，待样液全部流出后，用水和淋洗液依次进行淋洗，抽干所有的液体，分析物用甲醇洗脱并收集，摇匀，过0.45μm滤膜后，得供试品样品；二、标准曲线绘制：用甲醇将泰乐菌素标准贮备液稀释成质量浓度为1.00mg/L、5.00mg/L、10.00mg/L、20.00mg/L、50.00mg/L、100.00mg/L和200.00mg/L标准工作溶液，采用高效液相色谱仪对上述标准工作溶液进行检测，以测得峰面积为作纵坐标，以标准工作溶液浓度作为横坐标，绘制标准曲线，求回归方程和相关系数；三、测定：吸取上述标准工作品溶液和供试品样品注入液相色谱仪中，根据外标法计算泰乐菌素残留量；采用高效液相色谱仪对土壤中残留泰乐菌素进行测定；色谱条件：色谱柱：Agilent TC‑C18柱，色谱柱内径为4.6mm，柱长250mm，填料颗粒直径为5μm，流动相：乙腈‑0.01moL/L磷酸二氢钾溶液等度洗脱，检测波长：290nm，进样量：20μL，流速：1mL/min，柱温：30℃。