[发明专利]作为糖苷合酶的Endo-S2突变体、制备方法以及用于糖蛋白的糖工程化的用途有效
| 申请号： | 201780012943.8 | 申请日： | 2017-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN109071630B | 公开（公告）日： | 2022-05-31 |
| 发明（设计）人： | 王来曦;杨强;李铁正;童新 | 申请（专利权）人： | 马里兰大学帕克分校 |
| 主分类号： | C07K16/00 | 分类号： | C07K16/00;C12P21/00;A61K47/50 |
| 代理公司： | 中原信达知识产权代理有限责任公司 11219 | 代理人： | 金海霞;杨青 |
| 地址： | 美国马*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明提供了重组Endo‑S2突变体(被命名为Endo‑S2糖苷合酶)，其表现出降低的水解活性和增加的转糖基活性以用于合成糖蛋白，其中将所期望的糖链添加到岩藻糖基化或非岩藻糖基化的GlcNAc‑IgG受体。因而，本发明允许合成和重塑治疗性抗体，从而提供某些生物活性，如延长的体内半衰期、更小的免疫原性、增强的体内活性、提高的靶向能力、和/或递送治疗剂的能力。 | ||
| 搜索关键词： | 作为 糖苷 endo s2 突变体 制备 方法 以及 用于 糖蛋白 工程 用途 | ||
【主权项】：
1.一种制备具有预定的低聚糖部分的岩藻糖基化或非岩藻糖基化的糖蛋白的方法，所述方法包括：提供岩藻糖基化或非岩藻糖基化的受体蛋白，所述岩藻糖基化或非岩藻糖基化的受体蛋白包括岩藻糖基化的GlcNAc‑蛋白或非岩藻糖基化的GlcNAc‑蛋白；以及使用化脓性链球菌(Streptococcus pyogenes)(血清型M49)内切糖苷酶‑S2 Asp184突变体酶或其片段使所述岩藻糖基化或非岩藻糖基化的GlcNAc受体发生酶促反应，所述突变体酶或其片段包括催化结构域并且相对于野生型Endo‑S2酶表现出增加的转糖基活性和降低的水解活性，其中活化的低聚糖供体携带包含预定数量和类型的糖残基的低聚糖部分，其中经由酶促反应，所述活化的低聚糖部分与所述岩藻糖基化或非岩藻糖基化的GlcNAc受体共价连接，从而制备所述具有预定的低聚糖部分的岩藻糖基化或非岩藻糖基化的糖蛋白。
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