[发明专利]转座酶随机引发性DNA样品制备

摘要

本申请提供，除其他事项之外，多种通过转座酶‑5介导的对短DNA片段(例如，长度在约150bp和1.5Kb之间)加标签和扩增的方法。在一些方面，所述方法包括，例如，使用随机或基因特异性引物，使用条形码化的转座酶用第一引物序列将DNA片段加标签，然后进行引物延伸反应以引入第二引物序列。还提供了用于进行所述方法的试剂盒。

主权项

1.一种方法，所述方法包括：(a)使包含平均长度为150bp至1.5Kb的双链DNA片段的样品与多个各自负载有衔接子的转座酶双链体接触以产生带有衔接子标签的片段，其中所述衔接子包含双链体区和5'突出端区，所述双链体区包含转座酶识别序列，所述5'突出端区包含第一引物序列；(b)使用随机引物对带有衔接子标签的片段进行引物延伸反应以产生随机引物延伸产物，其中所述随机引物包含随机的3'序列和包含第二引物序列的5'序列；(c)使用在其3'端包含所述第一引物序列的正向引物与在其3'端包含所述第二引物序列的反向引物，通过聚合酶链反应(PCR)扩增(b)的随机引物延伸产物以产生PCR扩增产物。