[发明专利]用于构建标准化核酸文库的方法和系统在审

专利信息
申请号: 201780035786.2 申请日: 2017-04-05
公开(公告)号: CN109312396A 公开(公告)日: 2019-02-05
发明(设计)人: 张之宏;高杨滨;艾伦·E·埃克哈特;佩特·卡佩克 申请(专利权)人: 伊鲁米那股份有限公司
主分类号: C12Q1/6844 分类号: C12Q1/6844;C12Q1/6806;C12Q1/686;C12N15/10
代理公司: 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 代理人: 王玮玮;郑霞
地址: 美国加利*** 国省代码: 美国;US
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摘要: 本公开内容总体涉及适用于构建核酸样品,包括构建标准化核酸文库的核酸扩增系统和方法。在一些实施方案中,该方法包括提供一个或更多个输入核酸样品,使输入核酸样品(例如,输入文库)的每一个与包括第一扩增或标准化引物和第二扩增或标准化引物的反应混合物接触,其中第一扩增或标准化引物被固定在固体支持物上并且第二扩增或标准化引物处于溶液相中,并且在使得基本上所有的第一扩增或标准化引物被掺入扩增产物中的条件下扩增输入核酸样品。还提供经配置以执行本文公开的方法的系统和液滴致动器装置。还提供了根据公开的方法和系统制备的包含核酸样品和文库、优选地标准化的文库的组合物。
搜索关键词: 标准化 扩增 核酸样品 引物 构建 文库 核酸文库 核酸扩增系统 固体支持物 液滴致动器 扩增产物 系统制备 掺入 优选 配置
【主权项】:
1.一种用于核酸扩增的方法,包括:a)提供包含靶核酸分子的输入核酸样品;b)使所述核酸样品与包含固相和液相的反应混合物接触,其中:i.所述固相包含固定在固体支持物上的多个第一扩增引物,所述第一扩增引物能够与所述靶核酸分子的第一序列特异性杂交,并且ii.所述液相包含溶液中的多个第二扩增引物,所述多个第二引物能够与所述靶核酸分子的第二序列特异性杂交;c)在等温条件下扩增所述靶核酸分子,使得基本上所有的所述第一扩增引物被掺入扩增产物中,其中所述多个第一扩增引物以将扩增产物的产量限制在预定量的量提供,以及所述多个第二扩增引物以超过所述第一扩增引物的量的量提供。
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