[发明专利]提高基因组序列修饰技术中的突变导入效率的方法、及其使用的分子复合体

摘要

本发明提供修饰双链DNA的靶向位点的方法，所述方法包括以下步骤：通过将与该双链DNA中的靶核苷酸序列特异性结合的核酸序列识别模块与PmCDA1键合而成的复合体，导入具有该双链DNA的细胞，并将该细胞至少暂时地在低温下培养，从而使该靶向位点，即靶核苷酸序列及其附近的核苷酸发生缺失或转换为其它核苷酸、或向该部位插入核苷酸的步骤。

主权项

1.修饰双链DNA的靶向位点的方法，其包括以下步骤：通过将与选择的双链DNA中的靶核苷酸序列特异性结合的核酸序列识别模块与PmCDA1键合而成的复合体，导入到具有该双链DNA的细胞并将该细胞至少暂时地在低温下培养，从而在该靶向位点中不切割该双链DNA中的至少一条链、并使该靶向位点中的1个以上的核苷酸缺失或转换为其它1个以上的核苷酸、或向该靶向位点插入1个以上的核苷酸的步骤，该核酸序列识别模块为Cas的至少1个DNA切割能力失活的CRISPR‑Cas系统。