[发明专利]不对称模板和核酸测序的不对称方法

摘要

本发明是制备和使用模板用于核酸测序的新型方法。所述模板包括具有对称和非对称衔接子的环状和线性模板。所述方法包括以不对称方式利用模板。

主权项

1.测定样品中双链靶核酸的序列的方法，其包括：(a)使包含双链靶核酸的样品与包含双链茎区域和单链环区域的发夹衔接子分子接触；(b)将靶核酸分子的每个末端连接至衔接子分子的双链区域，由此形成环状接合分子，其包含靶核酸且具有双链区域和与双链区域共价连接的近端单链环区域和远端单链环区域；(c)使样品与栓系至固体支持物的限定浓度的阻断寡核苷酸接触，其中所述阻断寡核苷酸不可通过核酸聚合酶延伸，并且其与近端单链环区域互补，由此将所述环状接合分子捕获在固体支持物上并阻断近端单链环区域；(d)使所述样品和与远端单链环区域互补的寡核苷酸引物接触，由此使所述引物与远端单链环区域杂交；(e)用测序聚合酶延伸所述引物，由此测定双链靶核酸的序列。