[发明专利]免疫组库序列扩增方法及应用

摘要

本发明总体涉及免疫结合蛋白以及从基因组或其他来源获得免疫结合蛋白的方法的领域。本发明还涉及编码免疫结合蛋白的核酸，其中链的天然多聚结合在核酸和由其产生的免疫结合蛋白中维持。例如，使用本发明的方法编码从B细胞扩增的抗体的核酸维持来自B细胞的重链和轻链的天然配对。该配对(或多聚化)的维持产生免疫结合蛋白的文库和/或组库，其被富集用于有用的结合分子。

主权项

1.一种用于制备核酸的方法，包括步骤：提供多个宿主细胞，其中宿主细胞包括编码多聚免疫结合蛋白的多条多肽链的核酸，并且其中宿主细胞表达可结合抗原的免疫结合蛋白；将多个宿主细胞暴露于多个抗原，其中每个抗原具有识别抗原的独特条形码，并且其中每个抗原单独暴露于宿主细胞；识别与宿主细胞结合的抗原；向结合了抗原的宿主细胞添加第一引物组、第二引物组、第三引物组、多个dNTP和聚合酶；其中第一引物组包括正向引物和反向引物，其中第一引物组的引物之一具有编码免疫结合蛋白的第二多肽链的核酸的重叠延伸区，另一引物具有编码条形码的核酸的重叠延伸区，其中第一引物组扩增编码多聚免疫结合蛋白的第一多肽链的核酸；其中第二引物组包括正向引物和反向引物，其中第二引物组的引物之一具有编码第一多肽链的核酸的重叠延伸区，其中第二引物组扩增编码免疫结合蛋白的第二多肽链的核酸；其中第三引物组包括正向引物和反向引物，其中第三引物组的引物之一具有编码第一多肽链的核酸的重叠延伸区，其中第三引物组扩增编码条形码的核酸；使第一引物组、第二引物组、第三引物组、dNTP、聚合酶、条形码、编码多聚免疫结合蛋白的核酸和抗原与条形码反应，从而获得编码第一免疫多肽链、第二免疫多肽链和条形码的单个核酸。