[发明专利]可用于LC-MS分析的标记的聚糖氨基酸复合物及其制备方法在审
| 申请号： | 201780074612.7 | 申请日： | 2017-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN110023763A | 公开（公告）日： | 2019-07-16 |
| 发明（设计）人： | P.赖因维尔;M.A.劳伯;L.葛兴思;R.S.普伦布;E.科斯格拉夫;D.W.布鲁斯米歇 | 申请（专利权）人： | 沃特世科技公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 罗文锋;黄希贵 |
| 地址： | 美国麻*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本文提供了方法，在所述方法中使糖基化蛋白质或肽经受肽键裂解以产生聚糖氨基酸复合物，其中连接了N‑连接的或O‑连接的聚糖。然后将衍生化试剂连接到所述氨基酸的N末端以提供标记的聚糖氨基酸复合物。随后经由包括HILIC SPE的一种或多种方法从基质分离所述标记的聚糖氨基酸复合物，并将其直接注入到LC或LC/MS系统上用于分析、检测和表征所述糖基化蛋白质或所述肽。 | ||
| 搜索关键词： | 聚糖 氨基酸复合物 糖基化蛋白质 衍生化试剂 氨基酸 基质 可用 裂解 制备 肽键 分析 检测 | ||
【主权项】：
1.一种表征蛋白质或肽的糖基化的方法，包括以下步骤：提供多种糖基化蛋白质和/或肽；用变性溶液使所述多种糖基化蛋白质和/或肽变性以产生变性的混合物，其中所述变性溶液包含MS相容的表面活性剂、有机溶剂、脲和/或胍；将所述变性的混合物与多种蛋白酶组合以产生聚糖氨基酸复合物，其中所述多种蛋白酶裂解所述蛋白质或所述肽；用HILIC SPE纯化所述聚糖氨基酸复合物，其中所述聚糖氨基酸复合物被分离；以及用加标签试剂对所述聚糖氨基酸复合物加标签以产生标记的聚糖氨基酸复合物；检测所述标记的聚糖氨基酸复合物；以及通过所述标记的聚糖氨基酸复合物的检测来表征所述蛋白质或肽的糖基化。
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