[发明专利]降低引物二聚体形成且提高扩增效率的方法有效
| 申请号： | 201780081416.2 | 申请日： | 2017-12-22 |
| 公开（公告）号： | CN110168103B | 公开（公告）日： | 2023-09-08 |
| 发明（设计）人： | 李荣祚;金大荣 | 申请（专利权）人： | SEEGENE株式会社 |
| 主分类号： | C12Q1/6853 | 分类号： | C12Q1/6853 |
| 代理公司： | 中国贸促会专利商标事务所有限公司 11038 | 代理人： | 郑天松 |
| 地址： | 韩国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明涉及在多重扩增反应中通过降低的引物二聚体形成来扩增至少三个靶核酸分子的方法。本发明的方法可有效抑制在与至少三个靶核酸分子有关的多重扩增反应中引物二聚体形成及非特异性扩增产物的生成。 | ||
| 搜索关键词： | 降低 引物 二聚体 形成 提高 扩增 效率 方法 | ||
【主权项】：
1.在多重扩增反应中通过降低的引物二聚体形成来扩增至少三个靶核酸分子的方法，其包括：步骤(a)，制备分别包含正向引物及反向引物的至少三个引物对，上述每个引物对包含与对应的靶核酸分子有关的杂交核苷酸序列，上述至少一个引物对中的一个或两个引物为通用碱基引物，上述通用碱基引物具有1～3个通用碱基核苷酸，上述通用碱基核苷酸中的一个或两个位于在通用碱基引物的3’‑末端中的第三个核苷酸至第六个核苷酸范围的核心区域，其余位于在通用碱基引物的5’‑末端中的第四个核苷酸至在通用碱基引物的3’‑末端中的第七个核苷酸的范围内，使用上述至少三个引物对的多重扩增反应通过降低的引物二聚体形成来生成靶核酸分子的扩增产物，上述通用碱基核苷酸在通用碱基引物具有非连续性；步骤(b)，使用上述至少三个引物对进行包括引物退火、引物延伸及变性的至少两次循环的多重扩增反应，上述多重扩增反应通过降低的引物二聚体形成来生成靶核酸分子的扩增产物。
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