[发明专利]用于检测低频突变的靶向富集方法和试剂盒在审
| 申请号： | 201780091041.8 | 申请日： | 2017-07-21 |
| 公开（公告）号： | CN110651050A | 公开（公告）日： | 2020-01-03 |
| 发明（设计）人： | 杨林;高雅;蒲丹丹;张海萍;程云阳;陈芳;蒋慧 | 申请（专利权）人： | 深圳华大生命科学研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 44281 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 | 代理人： | 彭愿洁;彭家恩 |
| 地址： | 518083 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明提供了一种用于检测低频突变的靶向富集方法和试剂盒。该方法包括：在末端转移酶的作用下，在单链DNA和/或双链DNA每条链的3’端加上一段单一碱基的单聚核苷酸尾巴；以上游特异性引物和第一通用引物对突变目标位点所在的区域进行第一次PCR扩增，其中第一通用引物包括5’端的测序引物序列1和3’端的与单聚核苷酸尾巴互补的连续单一碱基；以下游特异性引物和第二通用引物对第一次PCR扩增的产物进行第二次PCR扩增，其中第二通用引物包括第一通用引物的测序引物序列1。 | ||
| 搜索关键词： | 通用引物 测序引物序列 特异性引物 通用引物对 单一碱基 聚核苷酸 突变 尾巴 末端转移酶 单链DNA 双链DNA 目标位 试剂盒 靶向 富集 条链 检测 | ||
【主权项】：
一种用于检测低频突变的靶向富集方法，其特征在于，包括：/n在末端转移酶的作用下，在单链DNA和/或双链DNA每条链的3’端加上一段单一碱基的单聚核苷酸尾巴；/n以上游特异性引物和第一通用引物对突变目标位点所在的区域进行第一次PCR扩增，其中所述上游特异性引物以与其互补的目标序列为锚定位点，所述第一通用引物以所述单聚核苷酸尾巴为锚定位点，且所述第一通用引物包括5’端的测序引物序列1和3’端的与所述单聚核苷酸尾巴互补的连续单一碱基；/n以下游特异性引物和第二通用引物对所述第一次PCR扩增的产物进行第二次PCR扩增，其中所述下游特异性引物位于所述上游特异性引物的下游且5’端带有测序引物序列2，所述第二通用引物包括所述第一通用引物5’端的测序引物序列1。/n
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