[发明专利]一种微生物多样性文库构建方法及其应用在审
申请号: | 201810000905.7 | 申请日: | 2018-01-02 |
公开(公告)号: | CN107904668A | 公开(公告)日: | 2018-04-13 |
发明(设计)人: | 李静;陈昌岳;王芳;张璐璐;胡秋萍;张祥林 | 申请(专利权)人: | 上海美吉生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06;C12Q1/6869 |
代理公司: | 上海光华专利事务所(普通合伙)31219 | 代理人: | 李艳,许亦琳 |
地址: | 201321 上海市浦东新区中国(上海)*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及分子生物学技术领域,特别是涉及一种微生物多样性文库构建方法及其应用。本发明新型的微生物多样性文库构建方法,利用单链连接及特殊标签引物接头对宏基因组进行微生物多样性文库构建,该方案适用于常规样品、微量样品、FFPE样品及150个以下的少量细胞团,扩大了微生物多样性研究的应用范围;单链连接及特殊标签的引入可将不同种群目的片段进行偏向性较小的富集,保证了物种丰富性以及样本不同物种丰度的真实性。此外,还具有起始量低并可对同一样本进行多物种鉴别的优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 微生物 多样性 文库 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种微生物多样性文库构建方法,包括如下步骤:(1)对微生物样本的基因组DNA进行处理,使其成为单链DNA;(2)将步骤(1)中获得的单链DNA与特殊标签引物接头进行连接,获得一端连接有特殊标签引物接头的单链DNA;(3)对步骤(2)中一端连接有特殊标签引物接头的单链DNA进行延伸,形成一端连接有特殊标签引物的双链DNA;(4)对步骤(3)获得的双链DNA与双链接头进行连接,获得两端均连接有接头的双链DNA;(5)对步骤(4)获得的两端均连接有接头的双链DNA进行扩增,获得微生物多样性文库。
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