[发明专利]一种高活性且抗逆性强的卵囊藻藻种的扩大化培养方法

摘要

本发明涉及水产养殖水质调控和水体环境治理技术领域，具体涉及一种高活性且抗逆性强的卵囊藻藻种的扩大化培养方法，该方法包括卵囊藻纯种的分离、纯种培育、高活性且抗逆性强的卵囊藻的选育以及二级扩大培养的步骤，并在温度23～28℃、光照1800～2000Lx的条件下连续充气培养。与现有技术相比，本发明所制备的卵囊藻藻种具有高活性和强抗逆性，其藻相稳定，能够长期保持养殖池的水质处于良性的平衡状态，可直接进行产业化培养，具有非常好的产业化应用前景。

主权项

1.一种高活性且抗逆性强的卵囊藻藻种的扩大化培养方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、纯种卵囊藻的分离由高产对虾养殖池中采集出卵囊藻样品，然后显微镜下分离并选取卵囊藻细胞；步骤二、纯种卵囊藻的培育将步骤一选取的卵囊藻细胞，接种至卵囊藻专用培养基中，在温度为23～28℃、光照1800～2000Lx的条件下连续充气培养纯化，12～18天后卵囊藻浓度达到65-75万个/ml时停止充气，沉淀后排去上层清液，获得卵囊藻纯种液1号25ml；步骤三、高活性且抗逆性强的卵囊藻的选育(1)取步骤二制备的卵囊藻纯种液1号25ml，接种到装有5000ml卵囊藻专用培养基的三角烧瓶中，并在温度为23～28℃、光照1800～2000Lx的条件下连续充气培育，6～9天后卵囊藻浓度达到65-75万个/ml时停止充气，沉淀后排去上层清液，获得卵囊藻纯种液2号250ml，卵囊藻浓度达到1300～1500万个/ml；(2)将步骤三(1)制备的卵囊藻纯种液2号250ml放于阴凉透气的环境中保藏，在静置中沉淀95～105天；(3)将步骤三(2)的经静置沉淀95～105天的卵囊藻纯种液2号接种到装有5000ml卵囊藻专用培养基的三角烧瓶中，并在温度为23～28℃、光照1800～2000Lx的条件下连续充气培育，12～18天后卵囊藻浓度达到65-75万个/ml时停止充气，沉淀后排去上层清液，获得卵囊藻纯种液3号250ml，卵囊藻浓度为1300～1500万个/ml；(4)重复步骤(2)和步骤(3)的步骤，至少重复三次以上进行反复选育后，获得高活性且抗逆性强的卵囊藻藻种1号；步骤四、扩大培养(1)一级扩大培养：将步骤三(4)选育出的高活性且抗逆性强的卵囊藻种1号250ml，接种至装有一级扩大培养基的50000ml培藻罐中进行一级扩大培养，控制在温度为23～28℃、光照1800～2000Lx的条件下连续充气培养，5～9天后卵囊藻浓度达65-75万个/ml，停止充气，沉淀后排去上层清液，获得一级扩大卵囊藻种2500ml，藻种浓度1300-1500万个/ml；(2)二级扩大培养：将所述一级扩大卵囊藻种2500ml接种至装有二级扩大培养基的500000ml培藻罐中进行二级扩大培养，控制在温度为23～28℃、光照1800～2000Lx的条件下连续充气培养，5～9天后卵囊藻浓度达65-75万个/ml，获得二级扩大培养藻种500000ml，藻种浓度65-75万个/ml。