[发明专利]同时测定消渴灵片和消渴灵胶囊中红参、黄芪和五味子含量的方法

摘要

本发明公开了一种同时测定消渴灵片和消渴灵胶囊中红参、黄芪和五味子含量的方法，该方法通过高效液相色谱‑质谱联用法，同时测定消渴灵片和消渴灵胶囊中红参、黄芪和五味子的含量，稳定性和重复性好、精密度和准确度高，具有专属性，阴性对照无干扰；为检查企业是否存在不投料或少投料、劣药材投料的行为提供有效依据。

主权项

1.同时测定消渴灵片和消渴灵胶囊中红参、黄芪和五味子含量的方法，其特征在于，所述方法包括以下内容：（1）色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，20mmol/L乙酸铵溶液为流动相B，进行梯度洗脱37分钟；流速为每分钟0.2mL；（2）质谱条件：采用电喷雾电离源，正离子方式扫描，MRM方式检测；干燥气温度：350℃；干燥气流速：5L/min；雾化气压力：40psi；鞘流气温度：350℃；鞘流气流速：10L/min；毛细管电压：4KV；喷嘴电压：500V；（3）内标储备液制备：称取联苯双酯对照品10.54mg，置100mL量瓶中，精密称定，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密吸取5mL，置200mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；（4）内标工作液制备：精密吸取内标储备液0.2mL，置25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；（5）供试品溶液制备：取样品0.4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入内标储备液0.1mL及甲醇-浓氨溶液25mL，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-浓氨溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液1mL，减压蒸干，用甲醇定容至10mL，摇匀，用微孔滤膜滤过，即得；（6）对照品储备液制备：称取人参皂苷Rg1对照品9.97mg、人参皂苷Re对照品10.00mg、人参皂苷Rb1对照品10.71mg、人参皂苷Rb3对照品10.92mg、人参皂苷Rd对照品10.16mg、黄芪甲苷对照品10.60mg、五味子醇甲对照品10.95mg，分别置10mL、10mL、10mL、5mL、5mL、10mL、25mL的量瓶中，精密称定，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；（7）混合对照品储备液制备：精密吸取上述对照品储备液各0.1mL、0.1mL、0.1mL、0.05mL、0.05mL、0.1mL、0.25mL，置25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；（8）线性关系实验：分别精密吸取上述混合对照品储备液1mL、0.6mL、0.4mL、0.2mL、0.1mL、0.1mL、0.1mL、0.1mL、0.01mL，分别置10mL、10mL、10mL、10mL、10mL、25mL、50mL、100mL、50mL量瓶中，加内标工作液适量使各份溶液中内标浓度为1ng/mL，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为各对照品曲线溶液；精密吸取上述各对照品曲线溶液各2μL，注入液相色谱质谱联用仪，测定，以待测成分峰面积积分值与联苯双酯峰面积积分值的比值为纵坐标，对照品的进样量为横坐标，绘制标准曲线；（9）方法学验证及实验仪器的考察：分别进行稳定性、精密度、重复性、专属性、准确度试验和不同色谱柱品牌的考察；（10）样品测定：取混合对照品溶液和供试品溶液各2μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。