[发明专利]一种用于治疗男性特有肿瘤的含有女性染色体干细胞的制剂及其制备方法

摘要

本发明公开了一种用于治疗男性特有肿瘤的含有女性染色体干细胞的制剂及其制备方法，所述制剂包括含有女性XX染色体的胚胎源骨髓间充质干细胞、外周血血浆蛋白和生理盐水。本发明利用含有女性特有染色体的干细胞可以治疗并预防由于男性雄激素水平过高引起的系列男性泌尿和生殖系统的良恶性肿瘤疾病。 1

主权项

1.一种用于治疗男性特有肿瘤的含有女性染色体干细胞的制剂，其特征在于所述制剂包括含有女性XX染色体的胚胎源骨髓间充质干细胞、外周血血浆蛋白和生理盐水。

2.根据权利要求1所述的含有女性染色体干细胞的制剂，其特征在于所述制剂中含有女性XX染色体的胚胎源骨髓间充质干细胞的浓度为(1‑3)×10⁷个/mL，外周血血浆蛋白的用量为80～160ng/mL，余量为生理盐水，配成1mL制剂。

3.根据权利要求1所述的含有女性染色体干细胞的制剂，其特征在于所述含有女性XX染色体的胚胎源骨髓间充质干细胞的制备方法为：

(1)将检测合格的女性胚胎骨髓间充质干细胞放置在含血清的DMEM/F12培养基的培养瓶中培养，将培养瓶置于温度为37℃、饱和湿度、5％的CO ₂浓度的培养箱内开始培养，每2～3天更换一次培养液，去除未贴壁的细胞；

(2)培养3天时，细胞长满后用0.05％胰酶消化后离心收集细胞；

(3)将步骤(2)收集的细胞重复上述步骤继续传代培养，待细胞达到90％以上密度，进行消化、传代，收集第3～5代细胞冻存、复苏备用；

(4)采用流式细胞仪筛选出标记和粘附分子高表达CD105、CD73、CD44，不表达或低表达CD34和CD45的细胞，做染色体核型分析，即获得所述含有女性XX染色体的胚胎源骨髓间充质干细胞。

4.根据权利要求3所述的含有女性染色体干细胞的制剂，其特征在于步骤(1)中所述DMEM/F12培养基中含有20mM/L HEPES、0.1％大豆胰酶抑制剂、25～50μg/mL转铁蛋白、10～20μg/mL纤粘连蛋白和20～60ng/mL的成纤维细胞生长因子‑4。

5.根据权利要求3所述的含有女性染色体干细胞的制剂，其特征在于步骤(1)中所述DMEM/F12培养基中血清的含量为10～15％。

6.根据权利要求1所述的含有女性染色体干细胞的制剂，其特征在于所述含有女性XX染色体的胚胎源骨髓间充质干细胞可以替换为含有女性染色体的其他人源干细胞。