[发明专利]一种同时筛选蛋白酶和纤维素酶的培养基及方法在审
| 申请号： | 201810032356.1 | 申请日： | 2018-01-12 |
| 公开（公告）号： | CN108165605A | 公开（公告）日： | 2018-06-15 |
| 发明（设计）人： | 王洁;贾恩朝;何智;王晋;于萌 | 申请（专利权）人： | 漯河医学高等专科学校 |
| 主分类号： | C12Q1/37 | 分类号： | C12Q1/37;C12Q1/34;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 462000 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种同时筛选蛋白酶和纤维素酶的培养基及方法。本发明培养基包括以下组分：1~3g硝酸钠、0.8~1.2g磷酸氢二钾、0.4~0.6g硫酸镁、0.4~0.6g氯化钾、1~3g羧甲基纤维素或微晶纤维素、8~12g明胶、1~3g酵母浸粉、16~18g琼脂或琼脂糖，加水定容至1000ml。本发明方法包括以下步骤：（1）将培养基制成琼脂糖凝胶平板，选择两个平板并接种相同的菌株或其发酵液培养24h；对一平板先进行碘熏后观察记录结果，碘熏颜色褪去后再进行考马斯亮蓝染色脱色观察记录结果；对另一平板直接进行考马斯亮蓝染色脱色后观察记录结果；根据观察记录结果判断出所具蛋白酶活性、纤维素酶活性的菌株。本发明环境友好，能同时检测和筛选纤维素酶和蛋白酶活性菌株，操作简单高效。 1 | ||
| 搜索关键词： | 记录结果 培养基 纤维素酶 菌株 考马斯亮蓝染色 蛋白酶 蛋白酶活性 脱色 观察 筛选 纤维素酶活性 羧甲基纤维素 氯化钾 磷酸氢二钾 琼脂糖凝胶 微晶纤维素 明胶 环境友好 酵母浸粉 发酵液 硫酸镁 琼脂糖 硝酸钠 定容 加水 琼脂 接种 检测 | ||
【主权项】：
1.一种同时筛选蛋白酶和纤维素酶的培养基，其特征在于，该培养基包括以下组分：1~3g 硝酸钠、0.8~1.2g 磷酸氢二钾、0.4~0.6g硫酸镁、0.4~0.6g氯化钾、1~3g羧甲基纤维素或微晶纤维素、8~12g明胶、1~3g酵母浸粉、16~18g琼脂或琼脂糖，加水定容至1000ml。2.如权利要求1所述的同时筛选蛋白酶和纤维素酶的培养基，其特征在于，该培养基包括以下组分：2g 硝酸钠、1g 磷酸氢二钾、0.5g硫酸镁、0.5g氯化钾、2g羧甲基纤维素或微晶纤维素、10g明胶、2g酵母浸粉、17g琼脂或琼脂糖，加水定容至1000ml。3.一种同时筛选蛋白酶和纤维素酶的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
（1）将权利要求1或1权利要求2所述的培养基制成琼脂糖凝胶平板，选择两个平板并接种相同的菌株或其发酵液培养24h；
（2）对一平板先进行碘熏5~10分钟，随后观察结果，拍照记录，碘熏颜色褪去后再进行考马斯亮蓝染色脱色观察结果，拍照记录结果；
（3）对另一平板直接进行考马斯亮蓝染色脱色后观察结果、拍照记录；
（4）根据步骤（2）、（3）所得的观察记录结果判断出具有蛋白酶活性的菌株、具有纤维素酶活性的菌株，或者同时具有蛋白酶活性和纤维素酶活性的菌株。
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