[发明专利]一种脊髓灰质炎病毒Ⅱ型D抗原预包被检测方法及其检测试剂盒和应用在审
申请号: | 201810032960.4 | 申请日: | 2018-01-13 |
公开(公告)号: | CN108287237A | 公开(公告)日: | 2018-07-17 |
发明(设计)人: | 龙润乡;谢忠平;罗芳宇;杨蓉;陈洪波;岳磊;谢天宏;李华;杨婷;王正鑫 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院医学生物学研究所 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569 |
代理公司: | 北京中政联科专利代理事务所(普通合伙) 11489 | 代理人: | 苏杭 |
地址: | 651000 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明提供一种预包被的可进行批量生产的脊髓灰质炎病毒(Polio virus)Ⅱ型D抗原检测方法,采用牛(兔、羊)抗Ⅱ型脊髓灰质炎病毒D抗原纯化抗体包被微孔板,并通过保护剂对包被板和包被抗体进行保护后制备成预包被板,同时配套辣根过氧化物酶标记的牛(兔、羊)抗Ⅱ型脊髓灰质炎病毒酶标抗体和其他试剂。该方法(试剂)可以对脊髓灰质炎病毒Ⅱ型D抗原进行特异性的定性和定量检测,对脊髓灰质炎病毒Ⅱ型C抗原,Ⅰ、Ⅲ型C、D抗原和其他肠道病毒无交叉,是一种特异性高、灵敏高,使用方便、用途广泛的Ⅱ型脊髓灰质炎病毒D抗原检测法,在IPV疫苗生产检定中有较高的应用价值。 | ||
搜索关键词: | 脊髓灰质炎病毒 预包被 辣根过氧化物酶标记 包被抗体 肠道病毒 定量检测 检测试剂 抗体包被 酶标抗体 疫苗生产 预包被板 种特异性 包被板 保护剂 检测法 微孔板 检测 检定 制备 灵敏 应用 定性 配套 生产 | ||
【主权项】:
1.一种脊髓灰质炎病毒Ⅱ型D抗原快速定性、定量检测方法,用于非临床疾病诊断治疗和非健康状况判断用途,其特征在于,包括以下步骤:S1、对动物抗Ⅱ型脊髓灰质炎病毒抗体进行制备并纯化,得动物抗Ⅱ型脊髓灰质炎病毒D抗原的纯化抗体;S2、用辣根过氧化物酶通过高碘酸钠法对动物抗Ⅱ型脊髓灰质炎病毒D抗原的纯化抗体进行标记,得动物抗Ⅱ型脊髓灰质炎病毒D抗原的检测用酶标抗体,制成酶标抗体使用液;S3、以动物抗Ⅱ型脊髓灰质炎病毒D抗原的纯化抗体进行酶标检测板的预包被处理,预包被处理中加入保护剂进行封闭保护;所述保护剂包括但不限于以下成分:BSA、明胶、酪蛋白、白蛋白、海藻糖、磷酸盐、碳酸盐中的一种或多种,制得预包被载体;,所得预包被载体能批量制作且能满足检测条件指标下实现长期存放;S4、采用预包被载体捕获待检抗原形成抗原抗体复合物,再与酶标记抗体使用液结合,通过底物催化酶显色,根据显色结果完成对脊髓灰质炎病毒Ⅱ型D抗原的定性检测或定量检测。
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