[发明专利]脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原同步快速鉴别、定量检测方法及其检测试剂盒和应用

摘要

本发明提供一种可同时对Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒（Polio virus）D抗原、单价疫苗、三价疫苗及联合疫苗进行特异性的鉴别检测方法，本方法酶标检测板是将牛、兔或羊抗Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒D抗原抗体按一定比例混合后包被在酶标检测板中，制备成预包被板，同时配套辣根过氧化物酶标记的牛、兔或羊抗Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒酶标抗体和其他试剂，成为可以同时对Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒D抗原快速鉴别检测的方法，对非目标型别的脊髓灰质炎病毒C、D抗原及目标型别的C抗原无交叉，是一种特异性高、灵敏高，使用方便、节约成本、用途广泛的Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒D抗原检测法，在IPV疫苗生产检定中有较高的应用价值。

主权项

1.脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原同步快速鉴别、定量检测方法，用于非临床疾病诊断治疗和非健康状况判断用途，其特征在于，包括以下步骤：S1、分别对动物抗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒单价抗体进行制备并纯化，得动物抗Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒D抗原的单价纯化抗体；S2、用辣根过氧化物酶通过高碘酸钠法分别对对动物抗Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒D抗原的单价纯化抗体进行标记，得动物抗Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒D抗原的检测用单价酶标抗体，制成单价酶标抗体使用液；S3、将动物抗Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒D抗原单价纯化抗体按等量比例混合后包被或预包被酶标检测板，预包被处理中加入保护剂进行封闭保护；所述保护剂包括但不限于以下成分：BSA、明胶，酪蛋白、白蛋白、海藻糖、磷酸盐、碳酸盐中的一种或多种，包被板经真空包装处理后制得预包被载体，所得预包被载体能批量制作且能满足检测条件指标下实现长期存放；S4、加入待检样品：脊髓灰质炎病毒的Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型单价或二价或三价样品，单价样品加1孔，二价样品加2孔、三 价样品加3孔形成抗原抗体复合物，通过洗板去除未结合的非目标样品，分别加入相应型别的单价的酶标记抗体使用液，待检抗原与对应的单价酶标记抗体结合，通过底物催化酶显色，根据显色结果完成对脊髓灰质炎病毒Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型D抗原同时快速鉴别检测或定量检测。