[发明专利]一种包含超级增强型TIL细胞的免疫细胞药物

摘要

本发明提供了一种将靶向B细胞的嵌合抗原受体(BCAR)和免疫检查点‑共刺激信号因子转换分子(Switch)联合跨膜表达在肿瘤浸润T淋巴细胞(TIL)或外周血游离肿瘤浸润T淋巴细胞(pTIL)上，制备“超级增强型TIL(SuperTIL)”细胞，以及制备包含SuperTIL的免疫细胞治疗药物。本发明所述药物可借助TIL本有的肿瘤特异识别性，实现SuperTIL对肿瘤的特异识别和杀伤，并借助SuperTIL的BCAR结构与体内B细胞的相互作用实现对SuperTIL在体内的大量扩增而增进对肿瘤的杀伤效果，以及借助SuperTIL的单种或多种Switch结构突破肿瘤微环境障碍，进一步增强SuperTIL对肿瘤的杀伤能力。本发明可成为一种免疫细胞药物应用于不区分癌种的抗肿瘤治疗中。

主权项

1.一种免疫细胞制备方法，制备“超级增强型TIL细胞(SuperTIL)”，其特征在于：1)所述SuperTIL是将一种或多种靶向B细胞表面蛋白的嵌合抗原受体(以下或简称“BCAR”)和一种或多种免疫抑制‑共刺激信号反向转换分子(以下或简称“Switch”)表达在肿瘤浸润T淋巴细胞(TIL)或外周血游离肿瘤浸润T淋巴细胞(pTIL)表面制备而得；2)所述BCAR具有以下特征：A.所述B细胞表面蛋白包括CD19、CD20、CD22以及其他任何B细胞广泛表达的膜蛋白：B.所述BCAR结构包括CD3ζ和靶向上述B细胞表面蛋白的抗体的可变区；C.所述BCAR结构可以包括CD28、41BB在内的共刺激因子以及其他基因或蛋白修饰，也可以不包括这些共刺激因子以及其他基因或蛋白修饰；D.所述BCAR结构可以包括或不包括TET‑ON或其他任何一种CAR或CAR‑T细胞表达调控以及令CAR‑T细胞自杀或凋亡的开关的元件；E.所述B‑CAR结构包含或不包含靶向CD19的抗体可变区，其序列如序列表SEQ ID NO：1所显示3)所述肿瘤浸润T淋巴细胞(TIL)是由以下方法获得的包含单种或多种TCR序列的克隆的T细胞混合物：从肿瘤组织中分离肿瘤浸润T淋巴细胞(TIL)而得，或进行或不进行对TIL的进一步扩增、改造或以包括但不限于PD1、CD137、TIM3等任意一种或几种分子为标志物的筛选；4)所述外周血游离肿瘤浸润T淋巴细胞(pTIL)是由由以下方法获得的包含单种或多种TCR序列的克隆的T细胞混合物：对外周血中的T细胞进行PD1、CD137、TIM3等一种或几种标志物进行筛选而得，或进行或不进行对其进一步扩增或改造；5)所述免疫抑制‑共刺激信号反向转换分子(Switch)包含以下ABCDEFG任意一种或多种特征：A.所述Switch是由任意一种免疫抑制蛋白与任意一种共刺激信号蛋白二者形成的蛋白复合物或融合蛋白，所述免疫抑制蛋白表达在胞外或跨膜区，所述蛋白复合物或融合蛋白跨膜表达B.所述免疫抑制蛋白是包括PD1、CTLA4，BTLA，TIM3，TIGIT，TGFβ受体以及其他任意具有免疫抑制功能或与免疫抑制信号通路相关的蛋白中的任意一种蛋白，或用任意一种具有免疫抑制功能或与免疫抑制信号通路相关的蛋白的配体的单克隆抗体如PDL1单抗；C.所述共刺激信号蛋白是包括CD28、41BB以及其他任意具有T细胞共刺激信号功能的蛋白中的任意一种蛋白；D.所述免疫检查点‑共刺激因子转换分子包含一种PD1‑CD28转换分子，其序列如序列表SEQ ID NO：2所显示；E.所述免疫检查点‑共刺激因子转换分子包含一种TIM3‑CD28转换分子，其序列如序列表SEQ ID NO：3所显示；F.所述免疫检查点‑共刺激因子转换分子包含一种TGFBR2‑CD28转换分子，其序列如序列表SEQ ID NO：4所显示；G.所述Switch的结构，可以包含或不包含免疫抑制蛋白与共刺激信号蛋白之外的其他蛋白或元件，包括但不限于自杀开关等起表达调控作用的蛋白或元件。