[发明专利]一种复合菌种发酵的四君子散的制备方法

摘要

本发明属于微生物繁殖过程中添加中药的发酵技术，尤其涉及一种复合菌种发酵的四君子散的制备方法；取四君子散组方中的党参60份、白术(炒)60份、茯苓60份、甘草(炙)30份；采用复合菌种固态发酵菌种发酵，采用的复合菌种固态发酵菌种分别为：地衣芽孢杆菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧杆菌和党参内生菌1号；使用复合菌种发酵后的四君子散，是一种完全取代抗生素的无药残、防病促生长的中药微生态制剂，由于四君子散和复合菌对免疫系统的协同作用，因此使用复合菌种发酵后的四君子散生产的兽药其免疫能力远远超过其它类产品及普通的四君子散。

主权项

一种复合菌种发酵的四君子散的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：步骤1）、取四君子散组方中的党参60份、白术60份、茯苓60份、甘草30份；水洗后烘干、然后粉碎成粉末，粉末大小为40‑80目；得到中药粉剂，备用；步骤2）、采用复合菌种固态发酵菌种发酵，采用的复合菌种固态发酵菌种分别为：地衣芽孢杆菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧杆菌和党参内生菌1号；步骤3）、将地衣芽孢杆菌接种到由5份牛肉膏、10份蛋白胨、5份氯化钠、20份琼脂和1000份水组成的培养基中，在使用恒温摇床在34度环境下培养24小时获得地衣芽孢杆菌原菌液；将党参内生菌1号菌种接种到PDA培养基中使用恒温摇床在34℃环境下培养24小时获得党参内生菌1号原菌液；将干酪乳杆菌接种到由15份葡萄糖、10份蛋白胨、10份牛肉膏、5份酵母膏、5份柠檬酸钠、2份磷酸二氢钾、5份醋酸钠、0.2份硫酸镁、0.2份硫酸锰和1000份水组成的培养基中，使用恒温摇床在34度环境下培养24小时获得干酪乳杆菌原菌液；使用与干酪乳杆菌相同的培养基和培养环境及方法分别获得嗜酸乳杆菌原菌液、双歧杆菌原菌液；然后分别对地衣芽孢杆菌原菌液、干酪乳杆菌原菌液、嗜酸乳杆菌原菌液、双歧杆菌原菌液、党参内生菌1号原菌液进行提纯；步骤4）、将提纯后的地衣芽孢杆菌原菌液和党参内生菌1号原菌液，从斜面接入三角瓶中，振荡培养24小时；将提纯后的干酪乳杆菌原菌液、嗜酸乳杆菌原菌液和双歧杆菌原菌液，从斜面接入克氏瓶中，温度控制34℃，培养24小时；步骤5）、将步骤4）中培养后的地衣芽孢杆菌原菌液、干酪乳杆菌原菌液、嗜酸乳杆菌原菌液、双歧杆菌原菌液、党参内生菌1号原菌液混合均匀，各个原菌液的占比为：地衣芽孢杆菌原菌液15~25%、干酪乳杆菌原菌液15~25%、嗜酸乳杆菌原菌液15~25%、双歧杆菌原菌液15~25%、党参内生菌1号原菌液15~25%，混合均匀后获得菌种原液，备用；步骤6）、培养基的制备；培养基采用红糖、中药粉剂和水制成，红糖1~2%，中药粉剂55~60%，余量为蒸馏水，得到培养基，备用；步骤7）、将步骤6）获得的培养基加热至34℃时接种，将步骤5）得到的菌种原液接种到培养基中，接种量为4％；采用厌氧发酵，温度34℃，发酵时间48~72小时，当PH值达到4.0时完成发酵，发酵完成以后晒干即得所述的复合菌种发酵的四君子散。