[发明专利]一种包裹纳米金颗粒的两性离子和吗啡啉修饰的聚酰胺-胺树状大分子的制备方法

摘要

本发明涉及一种包裹纳米金颗粒的两性离子和吗啡啉修饰的聚酰胺‑胺树状大分子的制备方法，包括：羧酸甜菜碱丙烯酰胺CBAA制备，G5.NH2‑CBAA制备，两性离子和吗啡啉修饰的聚酰胺‑胺树状大分子溶液制备，包裹纳米金颗粒的两性离子和吗啡啉修饰的聚酰胺‑胺树状大分子制备。本发明制备的树状大分子表面具有丰富氨基，具有良好的基因转染效果，为构建安全高效的基因载体，用于基因治疗提供了应用依据；本发明反应条件简单，合成制备易操作，制备得到的包裹纳米金颗粒的两性离子和吗啡啉修饰的聚酰胺‑胺树状大分子作为载体用于基因传染，转染条件简单，转染效率高，在癌症的基因治疗等方面具有潜在的应用前景。

主权项

1.一种包裹纳米金颗粒的两性离子和吗啡啉修饰的聚酰胺‑胺树状大分子的制备方法，具体步骤如下：(1)将β‑丙内酯与N‑[(3‑二甲基)丙基]丙烯酰胺以摩尔比为1‑3:1溶于溶剂中，搅拌反应，抽滤，冲洗，干燥，得到羧酸甜菜碱丙烯酰胺CBAA，其中，β‑丙内酯与溶剂的比例为2g‑3g:10mL；(2)将步骤(1)中羧酸甜菜碱丙烯酰胺CBAA溶于溶剂中，得到CBAA溶液，与第五代聚酰胺‑胺树状大分子G5.NH2溶液混合，搅拌反应，得到G5.NH2‑CBAA溶液，透析，冷冻干燥，得到G5.NH2‑CBAA，其中，CBAA与G5.NH2的质量比为1:1‑1:2，CBAA与溶剂的比例为15‑20mg:5mL；(3)将R‑吗啡啉‑3‑羧酸盐酸盐HCl.Morpholine‑COOH溶于溶剂中，用EDC溶液活化，得到活化好的HCl.Morpholine‑COOH溶液，加入到NH2‑PEG‑COOH溶液中，搅拌，得到HOOC‑PEG‑Morpholine溶液，记为HOOC‑PEG‑Mor溶液，其中HCl.Morpholine‑COOH与NH2‑PEG‑COOH的摩尔比为1:1‑1:3，HCl.Morpholine‑COOH与EDC的摩尔比为1:4‑1:6；(4)将步骤(2)中G5.NH2‑CBAA溶于溶剂中，得到G5.NH2‑CBAA溶液，用EDC溶液活化步骤(3)中HOOC‑PEG‑Mor溶液，然后加入G5.NH2‑CBAA溶液，搅拌反应，得到两性离子和吗啡啉修饰的聚酰胺‑胺树状大分子G5.NH2‑CBAA‑PEG‑Mor溶液，其中HOOC‑PEG‑Mor与EDC的摩尔比为1:3‑1:6，G5.NH2‑CBAA与HOOC‑PEG‑Mor的摩尔比为1:18‑1:25；(5)向步骤(4)中G5.NH2‑CBAA‑PEG‑Mor溶液中加入HAuCl4溶液，搅拌，加入NaBH4溶液还原，透析，冷冻干燥，得到干燥的包裹纳米金颗粒的两性离子和吗啡啉修饰的聚酰胺‑胺树状大分子{(Au0)25‑G5.NH2‑CBAA‑PEG‑Mor}，其中G5.NH2‑CBAA‑PEG‑Mor与HAuCl4的摩尔比为1:20‑1:25，HAuCl4与NaBH4的质量比为20:1‑25:1。