[发明专利]一种热稳定性提高的D-阿洛酮糖3-差向异构酶突变体有效

专利信息
申请号: 201810059404.6 申请日: 2018-01-22
公开(公告)号: CN108034648B 公开(公告)日: 2020-04-17
发明(设计)人: 沐万孟;张文立;黄嘉苇;江波;张涛 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N9/90 分类号: C12N9/90;C12N15/61;C12P19/24;C12P19/02;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 张勇
地址: 214122 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种热稳定性提高的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体,属于酶工程技术领域。本发明将来源于微生物Dorea sp.的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶作为亲本,构建了突变体酶F154Y/E191D/I193F,该突变体的热稳定性和结构稳定性得到了提高:50℃和60℃的t1/2值分别达到20.47和3.09h;Tm值达到74.18℃。多点突变体的最适温度上升为75℃,与野生型酶相比提高了5℃。在最适催化条件下,酶催化底物D‑果糖生成D‑阿洛酮糖的相对酶活提高了3.8%,这一发现对于工业化制备D‑阿洛酮糖具有重要的研究价值。
搜索关键词: 一种 热稳定性 提高 阿洛酮糖 差向异构 突变体
【主权项】:
1.一种D-阿洛酮糖3-差向异构酶的突变体酶,其特征在于,是将来源于微生物Doreasp.的D-阿洛酮糖3-差向异构酶的154位的苯丙氨酸突变为络氨酸Tyr,191位的谷氨酸突变为天冬氨酸Asp,同时193位的异亮氨酸突变为苯丙氨酸Phe。
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