[发明专利]一种用于早期结直肠癌的无创多基因甲基化联合检测的引物对和探针、试剂盒及其应用有效
| 申请号： | 201810061125.3 | 申请日： | 2018-01-22 |
| 公开（公告）号： | CN108103195B | 公开（公告）日： | 2021-08-03 |
| 发明（设计）人： | 徐赛涛;李杨;刘荣兵 | 申请（专利权）人： | 上海酷乐生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海申新律师事务所 31272 | 代理人： | 俞涤炯 |
| 地址： | 201200 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种用于早期结直肠癌的无创多基因甲基化联合检测的引物对和探针，其包括用于检测Spetin9、NDRG4、BMP3、THBD和SDC2基因甲基化的引物对和探针以及内参ACTB的引物对和探针，所述引物对和探针的序列如SEQ ID No：1‑SEQ ID No：18所示。本发明还提供了一种含有上述引物对和探针的试剂盒及其应用，该应用方法包括血浆标本游离DNA提取、亚硫酸盐转化、PCR扩增反应及荧光信号检测和结果判定。本发明所述的试剂盒及方法适用于定性检测人外周血中Spetin9、THBD、SDC2、NDRG4和BMP3五个基因的甲基化检测，其与常规的结直肠癌诊断方法相比，本发明充分利用了血浆游离DNA提取、DNA甲基化处理和QPCR相关联技术，开发出具有高灵敏度性、高特异性的试剂盒，对人结直肠癌进行早期无创筛查。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 早期 直肠癌 多基因 甲基化 联合 检测 引物 探针 试剂盒 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种用于早期结直肠癌的无创多基因甲基化联合检测的引物对和探针，其特征在于，包括分别用于检测Spetin9、NDRG4、BMP3、THBD和SDC2基因甲基化的引物对和探针；其中用于检测Spetin9基因甲基化的引物对为SEQ ID No：1和SEQ ID No：2所示序列，探针为SEQ ID No：3所示序列；用于检测NDRG4基因甲基化的引物对为SEQ ID No：4和SEQ ID No：5所示序列，探针为SEQ ID No：6所示序列；用于检测BMP3基因甲基化的引物对为SEQ ID No：7和SEQ ID No：8所示序列，探针为SEQ ID No：9所示序列；用于检测THBD基因甲基化的引物对为SEQ ID No：10和SEQ ID No：11所示序列，探针为SEQ ID No：12所示序列；用于检测SDC2基因甲基化的引物对为SEQ ID No：13和SEQ ID No：14所示序列，探针为SEQ ID No：15所示序列。
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