[发明专利]一种酵母基因组编辑载体及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201810064104.7 | 申请日： | 2018-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN108384812B | 公开（公告）日： | 2019-10-18 |
| 发明（设计）人： | 李爽;陈和锋;朱晁谊;朱牧孜 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N9/22 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 宫爱鹏 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种酵母基因组编辑载体及其构建方法和应用，以gRNA编码质粒P为出发载体，在该载体的复制起始点Ori两端分别引入同向34bp的LoxP序列，并在质粒P骨架位置引入Cre重组酶基因表达盒，获得酵母基因组编辑载体。该载体在以CRISPR/Cas9为媒介的基因编辑中的应用，能实现对酿酒酵母基因组的高效、多轮编辑。 | ||
| 搜索关键词： | 酵母基因组 构建 应用 酿酒酵母基因组 编码质粒 出发载体 骨架位置 引入 表达盒 起始点 多轮 同向 质粒 复制 媒介 基因 | ||
【主权项】：
1.一种酵母基因组编辑载体的构建方法，其特征在于，以gRNA编码质粒P为出发载体，在该载体的复制起始点Ori两端分别引入同向34 bp的LoxP序列，并在质粒P骨架位置引入 Cre重组酶基因表达盒，获得酵母基因组编辑载体；所述LoxP序列如SEQ ID NO ：1所示；所述Cre重组酶基因如SEQ ID NO ：2所示的核苷酸序列；所述出发载体为P426，并在P426的KpnI位点插入Cre重组酶表达盒；所述表达盒中的启动子为半乳糖诱导的GAL1启动子，终止子为CYC1 转录终止子。
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