[发明专利]质谱法检测甲型流感病毒多重PCR产物的方法及其产品有效
| 申请号： | 201810067031.7 | 申请日： | 2018-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN108085421B | 公开（公告）日： | 2018-12-04 |
| 发明（设计）人： | 马庆伟;钟逾;安娜;高佳敏;刘昕超;王佳 | 申请（专利权）人： | 北京毅新博创生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
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| 地址： | 102206 北京市昌平*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种通过质谱法直接检测甲型流感病毒的多重PCR产物的方法，包括使用特定引物对病毒DNA进行多重PCR扩增，并通过MALDI‐TOF MS检测多重PCR产物的片段的大小。该方法可检测选自H1N1、H3N2、H5N1和/或H7N9亚型甲型流感病毒，以及任意两种以上的组合。本发明还保护相关检测产品。本发明方法将多重PCR和MALDI‐TOF MS相结合用于临床病原微生物鉴定，不仅快速、简便，还易观察、直观、准确性高。 | ||
| 搜索关键词： | 甲型流感病毒 多重PCR产物 病原微生物鉴定 多重PCR扩增 质谱法检测 直接检测 病毒DNA 多重PCR 可检测 质谱法 亚型 引物 直观 检测 观察 | ||
【主权项】：
1.用于质谱法检测流感病毒的多重PCR产物的试剂盒，包含用于扩增H1N1亚型甲型流感病毒的H1片断的特异性引物序列为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2，和，用于扩增甲型流感病毒M片断的特异性引物序列为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4；用于扩增H3N2亚型甲型流感病毒的H3‑1片断的特异性引物序列为SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6，和，用于扩增H3N2亚型甲型流感病毒N2片断的特异性引物序列为SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10；用于扩增H3N2亚型甲型流感病毒的H3‑1片断的特异性引物序列为SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6，和，用于扩增H3N2亚型甲型流感病毒N2片断的特异性引物序列为SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10，以及，用于扩增甲型流感病毒M片断的特异性引物的核苷酸序列为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4；用于扩增H3N2亚型甲型流感病毒的H3‑2片断的特异性引物序列为SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8，和，用于扩增H3N2亚型甲型流感病毒N2片断的特异性引物序列为SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10，以及，用于扩增甲型流感病毒M片断的特异性引物的核苷酸序列为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4；用于扩增H5N1亚型甲型流感病毒的H5片断的特异性引物序列为SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12，和，用于扩增H5N1亚型甲型流感病毒的N1片断的特异性引物序列为SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14；用于扩增H7N9亚型甲型流感病毒的H7片断的特异性引物序列为SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16；和，用于扩增H7N9亚型甲型流感病毒的N9片断的特异性引物序列为SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.18；以及，以及用于扩增甲型流感病毒M片断的特异性引物的核苷酸序列为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4，以及用于质谱检测中所使用的点样基质，其中点样基质的组成为，3‑HPA∶DHC∶甲酸=4∶2∶1。
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