[发明专利]一种具有抗肿瘤活性的海洋放线菌

摘要

一种具有抗肿瘤活性的海洋放线菌，它采用海洋放线菌ZOUSKL‑019，经过如下步骤进行鉴定和分析：a）取菌种适量，接种到高氏1号琼脂固体斜面培养基上，在培养箱中培养；用接种针挑取适量袍子和菌体，接种到种子培养液的三角烧瓶中，培养获得种子培养液；取该种子培养液接种到内装培养液的三角烧瓶中，置于摇床上发酵得菌株发酵物；b）将富集了菌株培养液的树脂加入丙酮搅拌过夜，过滤后取清液，浓缩至干，得总浸膏；c）浸膏拌硅胶过柱，洗脱，得到10个组分Fr1—Fr10；经活性测试，取活性成分5经SephadexLH—20，氯仿—甲醇洗脱；d）采用SRB法得到的化合物1、化合物2分别具有抑人肺癌细胞A549、人白血病细胞K562。

主权项

1.一种具有抗肿瘤活性的海洋放线菌，其特征在于它采用海洋放线菌ZOUSKL‑019，经过如下步骤进行鉴定和分析：a）菌种发酵：按培养微生物的常规方法，取菌种适量，接种到高氏1号琼脂固体斜面培养基上，在25—30℃培养箱中培养3—5天；用接种针挑取适量袍子和菌体，接种到含100ml种子培养液的500mL三角烧瓶中，置于摇床中，在25—30℃、100—150r/min条件下培养46—50h，获得种子培养液；取该种子培养液按5%的接种量接种到内装150mL培养液的500mL三角烧瓶中，置于25—30℃、100—150r/min的摇床上发酵5—10天，在培养结束前，按照30g/L加入XAD—16树脂，过滤树脂，即得菌株发酵物；b）提取物的制备：将富集了菌株培养液的树脂加入丙酮搅拌过夜，过滤后取清液，浓缩至干，用丙酮提取树脂2次后，合并萃取液，浓缩至干，得总浸膏；c）活性成分的追踪分离：浸膏拌硅胶过柱，以石油醚：氯仿：甲醇梯度洗脱，得到10个组分Fr1—Fr10；每个组分经上述活性测试方法进行活性测试，取活性成分5经SephadexLH—20，氯仿—甲醇（1：1）洗脱，正相硅胶加压柱，最后经半制备反相高效液相色谱，甲醇—水洗脱，分别得到化合物1、化合物2；d）活性测试：采用SRB法结合显微镜观察细胞形态变化，得到的化合物1、化合物2分别具有抑人肺癌细胞A549、人白血病细胞K562，在100 ug/mL浓度下抑制率分别是55%、90%。