[发明专利]一种改良SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳工艺有效
| 申请号： | 201810084729.X | 申请日： | 2018-01-29 |
| 公开（公告）号： | CN108387630B | 公开（公告）日： | 2019-09-03 |
| 发明（设计）人： | 刘永安;许立奎;潘彬荣;岳高红;梅喜雪 | 申请（专利权）人： | 温州科技职业学院 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447 |
| 代理公司： | 温州名创知识产权代理有限公司 33258 | 代理人： | 陈加利 |
| 地址： | 325000 浙江省温州市瓯*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种改良SDS‑聚丙烯酰胺凝胶电泳工艺，本发明对传统SDS‑聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行了改良，根据传统SDS‑聚丙烯酰胺凝胶电泳后经考马斯亮蓝染色，查看中国春和宁春4号HMW‑GS分离情况，然后用直尺测量宁春4号1Ax1亚基在分离胶内的迁移距离，并据此计算放大胶的灌入量，在原有的基础上增加了放大胶，改良SDS‑聚丙烯酰胺凝胶电泳技术通过放大胶的放大作用，将不同蛋白质亚基条带间的距离明显拉大，其分辨率得到显著提高。 | ||
| 搜索关键词： | 聚丙烯酰胺凝胶电泳 改良 聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 放大 考马斯亮蓝染色 蛋白质亚基 放大作用 迁移距离 分离胶 原有的 分辨率 灌入 条带 直尺 测量 | ||
【主权项】：
1.一种改良SDS‑聚丙烯酰胺凝胶电泳工艺，其特征在于，包括以下步骤：(1)高分子量谷蛋白亚基的提取分别取小麦品种为中国春和宁春4号的小麦种子放入一个离心管中，然后进行研磨，按每mg小麦种子加25μL蛋白质提取液，于蜗旋混匀器上充分混匀；沸水浴10min，取出冷却至室温，10000rpm离心10min，取上清液上样；(2)改良SDS‑聚丙烯酰胺凝胶电泳，采用双板夹芯式垂直电泳槽和电泳仪，浓缩胶浓度为5％，放大胶的浓度为12.5％，分离胶浓度为8％，三者交联度均为3.33％，当溴酚蓝跑出凝胶后即停止电泳，用考马斯亮蓝染色；所述的分离胶包括以下组分，以体积份数计：![]()
所述的放大胶包括以下组分，以体积份数计：![]()
所述的浓缩胶包括以下组分，以体积份数计：![]()
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