[发明专利]一种载有促进骨形成蛋白及消除关节炎症状药物的双层复合缓释微球及其制备方法

摘要

本发明涉及一种载有促进骨形成蛋白及消除关节炎症状药物的双层复合缓释微球及其制备方法。其中，首次将PLGA‑PCL‑MPEG用于载药体，该嵌段共聚物无毒、无热敏性，且具有良好的组织相容性，且有一定的消炎作用，相对于传统的MPEG‑PCL嵌段聚合物作为载体对于缓释药物方便有明显提高，并有效提高治疗效果。羧甲基海藻酸钠可有效促进BMP骨形态发生蛋白的生成，胶原蛋白肽与软骨素的相互作用，不仅能够提高软骨缓冲避免关节炎，还能够保持钙不流失，预防骨质疏松的风险；同时，制备得到双层缓释微球，增加了微球的机械强度性能，有利于在体内缓慢释放消化，通过调整压力改变内层载药微球的包覆率，进而调整药物释放速度。

主权项

1.一种载有促进骨形成蛋白及消除关节炎症状药物的双层复合缓释微球的制备方法，由外层和内层两部分组成，内层为聚己内酯-甲氧基聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸(PLGA-PCL-MPEG)共聚物负载羧甲基海藻酸钠、软骨素和胶原蛋白肽形成的微球，外层包覆层由壳聚糖CS，聚乳酸PLA，聚乙二醇PEG和羟基磷灰石HA组成，具体制备方法如下：/n1)对所有的用于生产制备双层复合缓释微球的原材料和辅助用材料按照对应的质量标准进行检验和称量，符合规定的质量标准；/n2)配制羧甲基海藻酸钠、软骨素和胶原蛋白肽的混合溶液；/n2.1分别称量配比为1-3:1:1-2羧甲基海藻酸钠、软骨素、胶原蛋白肽于匀浆机中；/n2.2量取适量的二氯甲烷500ml，并倒入2.1的匀浆机中；/n2.3在50℃微波条件下，匀浆机开始剪切搅拌，搅拌速率为70-110rpm，剪切搅拌时间为1-2h，形成混合均匀的溶液，放入冰箱中低温备用，并在12小时内使用完毕；/n3)配制载体溶液；/n3.1配置合成嵌段共聚物的有机溶剂，将适量偶氮二异丁腈和2,2'-联吡啶分别作为引发剂和催化剂加入到四氢呋喃溶液中，室温下搅拌混合均匀，得到透明的混合溶液；/n3.2采用活性可控的原子转移自由基聚合技术，在偶氮二异丁腈/2,2'-联吡啶/四氢呋喃的反应体系下，在微波辐射条件下，加入质量比为3:2:1的聚己内酯和甲氧基聚乙二醇以及聚乳酸-羟基乙酸进行反应，反应完全后离心洗涤得到聚己内酯-甲氧基聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸(PLGA-PCL-MPEG)嵌段共聚物用二氯甲烷分散备用；/n4)微流控芯片技术生成内层载药微球；/n4.1将2.3得到的溶液注入第一流道，3.2得到的溶液注入第三流道，聚乙烯醇注入第二流道作为剪切相；/n4.2第一、第二和第三流道中的介质同时注入交汇流道并充分碰撞剪切制备乳液，将得到的乳液挥发有机溶剂，分别采用水和丙酮离心洗涤后冷冻干燥，即得到内层载药微球；/n5)采用加压包裹法制备双层复合微球；/n5.1将一定配比量的壳聚糖CS，聚乳酸PLA，聚乙二醇PEG和羟基磷灰石HA分散到氯仿中，搅拌一定时间至溶解均匀；/n5.2将4.2得到的载药微球均匀平铺在表面光洁强度足够的平面上，用另一个表面光洁强度足够的平面压在载药微球上进行加压，调整到合适的压力后，在载药微球周围滴加5.1得到的溶液，常温下至氯仿挥发后重复滴加至包覆完成，得到载有促进骨形成蛋白及消除关节炎症状药物的双层复合缓释微球。/n