[发明专利]一种同时检测干血斑、血液和尿液中四十种氨基酸的方法

摘要

本发明公开了一种同时检测干血斑、血液和尿液中四十种氨基酸的方法，首先通过简单的液液萃取方法对生物样本进行前处理，然后进入色谱分离及质谱检测，针对每种氨基酸分别以其相对保留时间和定性离子对作为定性依据，以标准品制作标准曲线定量。同时，本方法应用三个水平的质控品考察方法的准确性、有效性，避免检测结果失真。本发明首次实现了应用HPLC‑MS/MS技术对一份样本中的四十种非衍生化氨基酸同时检测的目的，该方法操作简便快速，通量高、成本低，有效实时监测人体内氨基酸水平，对临床疾病诊断提供充分依据，易于临床推广及普及。

主权项

1.一种同时检测干血斑、血液和尿液中四十种氨基酸的方法，其特征在于：采用HPLC‑MS/MS方法对四十种氨基酸进行检测，液相色谱的流动相A为含十三氟庚酸的水，B为含十三氟庚酸的乙腈，梯度洗脱；质谱采用正离子电喷雾离子化的多离子反应监测模式；四十种氨基酸为：甘氨酸、丙氨酸、β‑丙氨酸、肌氨酸、α‑氨基正丁酸、γ‑氨基丁酸、丝氨酸、脯氨酸、缬氨酸、苏氨酸、牛磺酸、亮氨酸、异亮氨酸、5‑氨基乙酰丙酸、鸟氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、组氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、瓜氨酸、酪氨酸、肌肽、色氨酸、同型半胱氨酸、乙醇胺、肌酸酐、乙酸胍、别异亮氨酸、肌酸、α‑氨基乙二酸、3‑甲基组氨酸、1‑甲基组氨酸、高丝氨酸、精氨基琥珀酸、3‑羟基脯氨酸。