[发明专利]一种包含重组融合抗原A和B的丙型肝炎病毒抗体检测试剂及应用和重组融合抗原A和B

摘要

本发明一种包含重组融合抗原A和B的丙型肝炎病毒抗体检测试剂及应用和重组融合抗原A和B，属于生物工程技术领域。所述一种包含重组融合抗原A和B的丙型肝炎病毒抗体检测试剂，其中重组融合抗原A包含的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；所述重组融合抗原B包含的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；所述检测试剂由R1试剂、R2试剂、R3试剂和R4试剂组成。本发明具有以下优点：本发明的两个重组融合抗原具有特异性高、稳定性好的特点，通过一定的比例混合使用，可用于丙型肝炎病毒抗体检测试剂的制备，试剂的临床检测效果显著。同时该检测试剂对乳糜微粒、胆红素以及血红蛋白具有很强的抗干扰能力，可极大满足丙型肝炎病毒临床诊断的需求。

主权项

1.一种包含重组融合抗原A和B的丙型肝炎病毒抗体检测试剂，其特征在于：所述重组融合抗原A包含的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；所述重组融合抗原B包含的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；所述检测试剂由R1试剂、R2试剂、R3试剂和R4试剂组成；其中：R1试剂的缓冲液组成为：Na2HPO4·12H2O 2.56g/L、NaH2PO4·2H2O 0.436g/L、NaCl 9g/L、甘露醇20～50g/L、酪蛋白10～30g/L、果绿色素0.1～0.5g/L、TritonX‑100 0.1～0.5ml/L、PC‑300 0.5～2ml/L、丙三醇5～20ml/L；HRP‑鼠抗人IgG 0.5～10mg/L；R2试剂的缓冲液组成为：Na2HPO4·12H2O 5.8g/L、NaH2PO4·2H2O 0.592g/L、NaCl 9g/L、Tween‑20 0.1～0.5ml/L、丙三醇5～20ml/L、PC‑300 0.5～2ml/L；R3试剂的缓冲液组成为：Na2HPO4·12H2O 2.56g/L、NaH2PO4·2H2O 0.436g/L、NaCl 9g/L、甘露醇10～50g/L、酪蛋白5～20g/L、牛血清白蛋白0.1～1g/L、PVP‑40 1～5g/L、PVA 0.05～0.5g/L、Tween‑20 5～20ml/L、TritonX‑100 0.05～0.2ml/L、丙三醇5～20ml/L、PC‑300 0.5～2ml/L、链霉亲和素0.1g/L、包被重组融合抗原的磁珠0.2～1g/L；所述包被重组融合抗原的磁珠中，重组融合抗原A和重组融合抗原B按照一定比例混合后再进行包被磁珠，其中重组融合抗原A的包被量为10～50μg/mg磁珠，重组融合抗原B的包被量为0.1～10μg/mg磁珠；R4试剂的缓冲液由A体系和B体系组成，其中A体系为：鲁米诺0.8～1.2g/L、对碘苯酚0.1～1g/L、肉桂酸1～2g/L、EDTA 5～10g/L、聚乙二醇600 1～2.5g/L、Tween‑20 5～20ml/L、PC‑300 0.5～2ml、Tris 0.1～0.2mol/L、pH8.0～9.0；B体系为：H2O2 4～10mol/L，Tris 0.1～0.2mol/L、pH8.0～9.0；使用时A体系和B体积等体积加入。