[发明专利]一种渗透胁迫处理提高大花萱草EMS离体诱变率的方法在审
| 申请号： | 201810109647.6 | 申请日： | 2018-02-05 |
| 公开（公告）号： | CN108377909A | 公开（公告）日： | 2018-08-10 |
| 发明（设计）人： | 杨丽莉;刘化涛;杨睿;闫六英;畅平 | 申请（专利权）人： | 山西省农业科学院旱地农业研究中心 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00;A01H1/06 |
| 代理公司： | 北京志霖恒远知识产权代理事务所(普通合伙) 11435 | 代理人： | 申绍中 |
| 地址： | 030031 山西*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 一种渗透胁迫处理提高大花萱草EMS离体诱变率的方法，目的是提高EMS对大花萱草离体诱变效率；本发明以生长发育正常的1‑2cm的大花萱草花蕾为材料，以子房为外植体诱导的愈伤组织接入分化培养基,分化出绿色小芽，成为带芽愈伤组织；带芽愈伤组织分化培养10天后、EMS诱变前用高渗透T固体培养基胁迫处理愈伤组织30‑60分钟；取出愈伤组织后直接用浓度为0.75‑1.0%（w/v）的EMS半致死剂量处理该愈伤组织块60分钟；处理后的愈伤组织接种于分化培养基进行分化培养，获得再生植株；待再生植株长至1‑2cm高时，从愈伤组织上切下转接进入继代培养基继代培养15天；以浓度为40%（v/v）的萱草叶枯病菌毒素半致死剂量为定向选择压进行胁迫筛选，获得抗病突变体植株。 | ||
| 搜索关键词： | 愈伤组织 大花萱草 离体诱变 分化培养基 分化培养 渗透胁迫 再生植株 胁迫 致死 子房 萱草 固体培养基 继代培养基 抗病突变体 外植体诱导 愈伤组织块 定向选择 继代培养 绿色小芽 生长发育 叶枯病菌 花蕾 植株 转接 高渗透 毒素 切下 接种 取出 分化 筛选 | ||
【主权项】：
1.一种渗透胁迫处理提高大花萱草EMS离体诱变率的方法，其特征是：（1）以生长发育正常的1‑2cm的大花萱草花蕾为材料，以子房为外植体诱导的愈伤组织接入分化培养基,分化出绿色小芽，成为带芽愈伤组织；（2）带芽愈伤组织分化培养10天后、EMS诱变前用高渗透T固体培养基：MS全量+6BA0.5mg/L+IBA0.2mg/L+甘露醇36g/L+山梨醇36g/L+蔗糖50g/L+琼脂粉8g/L，胁迫处理愈伤组织30‑60分钟；（3）取出愈伤组织后直接用浓度为0.75‑1.0%（w/v）的EMS半致死剂量处理该愈伤组织块60分钟；（4）处理后的愈伤组织接种于分化培养基进行分化培养，获得再生植株；待再生植株长至1‑2cm高时，从愈伤组织上切下转接进入继代培养基继代培养15天；（5）以浓度为40%（v/v）的萱草叶枯病菌毒素半致死剂量为定向选择压进行胁迫筛选，获得抗病突变体植株。
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