[发明专利]一种明胶中貉源性成分实时荧光PCR检测方法在审
| 申请号： | 201810120688.5 | 申请日： | 2018-02-07 |
| 公开（公告）号： | CN108374050A | 公开（公告）日： | 2018-08-07 |
| 发明（设计）人： | 刘金华;王岸英;刘婧;聂丹丹;罗雁非;王玮琳;曲辉;吴鑫本 | 申请（专利权）人： | 吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12Q1/6806;C12N15/11 |
| 代理公司： | 长春市东师专利事务所 22202 | 代理人： | 张铁生 |
| 地址： | 130062 吉林*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种明胶中貉源性成分实时荧光PCR检测的引物和探针以及优化方法，具有良好的灵敏性和特异性，方法，其步骤如下：a.提取待检明胶样品中DNA；b.以提取的DNA为模板，加入上述的引物和带荧光染料的探针以及酶反应液进行实时荧光PCR反应，记录样本反应的扩增曲线和Ct值，根据扩增曲线和Ct值判定结果；实时荧光PCR反应体系为：2×Real‑time PCR预混液；10µmol/L貉特异基因上游引物；10µmol/L貉特异基因下游引物；10µmol/L貉特异基因探针；1~100 ng/μL模板DNA；通过上述方法，明胶中是否含有貉源性成分，而完成了食品检测体系。 | ||
| 搜索关键词： | 明胶 特异基因 探针 实时荧光PCR检测 实时荧光PCR 扩增曲线 引物 酶反应液 判定结果 上游引物 食品检测 下游引物 荧光染料 模板DNA 灵敏性 样本 记录 优化 | ||
【主权项】：
1.实时荧光PCR检测明胶中貉源性成分的引物和探针，碱基序列分别为：貉特异基因上游引物： CTATACCTGGCATCTGGTTCTTACC；貉特异基因下游引物： GTCCCATTTGAGTGGATTAGTAGGA；貉特异基因探针： CAGGGCCATGAACTCCCTCCATCC，其特征在于：所述的貉特异基因探针带荧光染料，5’端为FAM标记，3’端为TAMRA标记。
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