[发明专利]一种鼠抗人IgE单克隆抗体及其制备方法和应用在审
申请号: | 201810122189.X | 申请日: | 2018-02-07 |
公开(公告)号: | CN108341878A | 公开(公告)日: | 2018-07-31 |
发明(设计)人: | 李子樵;段爽 | 申请(专利权)人: | 上海蓝怡科技股份有限公司;浙江蓝怡医药有限公司 |
主分类号: | C07K16/42 | 分类号: | C07K16/42;C12N5/20;G01N33/68 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 巩克栋 |
地址: | 201199*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种鼠抗人IgE单克隆抗体及其制备方法和应用,所述方法包括以下步骤:(1)小鼠免疫:采用人源IgE蛋白与弗氏佐剂的混合液,免疫小鼠;(2)细胞融合和筛选:取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行体外融合和细胞筛选,得到稳定分泌鼠抗人IgE单克隆抗体的杂交瘤细胞株;(3)腹水制备:培养步骤(2)所述的杂交瘤细胞株,将细胞上清液注入小鼠腹腔,从腹水中得到所述鼠抗人IgE单克隆抗体;其中,所述人源IgE蛋白为纯度不小于99.0%的完整的人源IgE蛋白。本发明的方法采用纯度不小于99.0%的完整的人源IgE蛋白免疫小鼠,方法效率较高、操作简单、成本较低,得到的抗人IgE单克隆抗体纯度较高、特异性强、重复性好,可用于制备IgE检测试剂。 | ||
搜索关键词: | 单克隆抗体 鼠抗人IgE 人源 制备方法和应用 杂交瘤细胞株 蛋白 制备 抗人IgE单克隆抗体 骨髓瘤细胞 小鼠脾细胞 蛋白免疫 弗氏佐剂 检测试剂 免疫小鼠 特异性强 体外融合 细胞融合 细胞筛选 小鼠腹腔 小鼠免疫 混合液 上清液 腹水 可用 水中 小鼠 分泌 筛选 细胞 | ||
【主权项】:
1.一种鼠抗人IgE单克隆抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)小鼠免疫:采用人源IgE蛋白与弗氏佐剂的混合液,免疫小鼠;(2)细胞融合和筛选:取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行体外融合和细胞筛选,得到稳定分泌鼠抗人IgE单克隆抗体的杂交瘤细胞株;(3)腹水制备:培养步骤(2)所述的杂交瘤细胞株,将细胞上清液注入小鼠腹腔,从腹水中得到所述鼠抗人IgE单克隆抗体;其中,所述人源IgE蛋白为纯度不小于99.0%的完整的人源IgE蛋白。
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